部分中国原产柿属雄性种质的生物学特性及其新种质创制的研究

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柿(Diospyros kaki Thunb.)为柿科(Ebenaeeae)柿属(Diospyros spp.)果树植物。我国拥有丰富的柿资源,其中不乏珍贵种质。近年来,在鄂、豫、皖三省交界的大别山区新发现一系列柿属完全雄性种质,但其基本生物学特性及其育种学价值尚不清楚。我们以部分完全雄性种质为试材,首先对其物候期,叶、花形态学,花粉生活力及其授粉亲和性,以及其染色体倍性等进行了系统研究:进而通过观察小孢子发生过程和测定花粉直径,确认其2n花粉的产生机制:同时,研究合子胚时期甜柿胚珠培养技术体系和不同幼胚发育阶段对胚抢救效果的影响;最后,以完全雄性种质为父本,与中国优良柿种质‘磨盘柿‘和‘罗田甜柿’进行杂交育种。此外,利用抗微管除草剂诱导‘罗田甜柿’幼胚和离体茎尖加倍获得多倍体。主要研究结果如下:1.供试完全雄性种质的染色体倍性均为6倍体,与柿(Diospyros kaki Thunb.)的倍性一致。2.供试完全雄性种质的物候期与其它栽培柿种质基本一致;各完全雄性种质之间的叶、花形态有差异;完全雄性种质具有花粉量多、花粉离体萌发率较高、花粉与‘前川次郎’和‘磨盘柿’柱头亲和等特性。3.在武汉地区,供试完全雄性种质小孢子母细胞减数分裂3月底完成,中期Ⅰ到末期Ⅱ的分裂进程较快:第一次减数分裂正常,中期Ⅱ检测到纺锤体异常定位现象,主要有八字形纺锤体和融合纺锤体,它们分别形成三分体和二分体,最终导致2n花粉发育;其巨大花粉自然发生频率,二分体比例和三分体比例分别是0-2.3%,0.8%-2.2%和2.3%-4.3%,巨大花粉自然发生频率与二分体和三分体比例之和的相关性系数r=0.98**,表明巨大花粉即为2n花粉;八字形纺锤体和融合纺锤体形成的2n花粉在遗传上等同于FDR型配子,少数由姐妹染色单体不正常分离形成的2n花粉在遗传上等同于SDR型配子。4.授粉后25d‘前川次郎’胚珠培养效果最好;培养基效果最好的为MS(1/2N)添加1.0mg/L IAA,2.2mg/L ZT激素组合,其次为添加1.0mg/L IAA,0.44mg/L ZT组合。‘次朗’授粉后40d、50d、60d后幼胚发育分别处于球形期,心形或鱼雷形期,子叶形期;球形期后的幼胚接种后均能100%萌发,授粉后50~60d的幼胚成苗率、再生植株苗高和生根数均好于其他接种时期,为最佳幼胚培养时期。5.通过胚挽救技术,获得以‘磨盘柿’为母本,以部分供试完全雄性种质作父本的6个杂交组合的137株F1杂种幼苗。包括:磨盘柿×雄株1号(7株),磨盘柿×雄株2号(28株),磨盘柿×雄株3号(72株),磨盘柿×雄株8号(5株),磨盘柿×雄株9号(2株),磨盘柿×雄株10号(23株)。部分胚挽救幼苗已成功移栽大田,生长发育情况良好。此外,还获得以‘罗田甜柿’为父本,以‘磨盘柿’,‘鄂柿1号’和‘宝盖甜柿’作母本的3个杂交组合的228株F1杂种幼苗。包括:磨盘柿×罗田甜柿0株,鄂柿1号×罗田甜柿(185株),宝盖甜柿×罗田甜柿(43株)。通过收集成熟种子获得以.‘罗田甜柿’为母本,以完全雄性种质作父本的3个杂交组合的108粒种子。包括:罗田甜柿×雄株2号(14粒),罗田甜柿×雄株3号(29粒),罗田甜柿×雄株10号(64粒)。6.抗微管除草剂可诱导‘罗田甜柿’幼胚染色体加倍,其中以200μmol/L的安磺磷处理幼胚2-4d的效果较好,而秋水仙素不能诱导幼胚加倍;氟乐灵亦可诱导‘罗田甜柿’离体茎尖染色体,其中100μmol/L处理离体茎尖30d的诱导率达19.4%。获得的变异株表现叶片较厚、颜色较深、节间较短,且叶片气孔孔径变大、密度变小,叶片重量增大。诱导植株DNA含量为6倍体对照的两倍。
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