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鸡枞菌[Termitomyces albuminosus (Berkeley&Broome) Heim]是与白蚁共生的真菌,主要分布于非洲热带、亚洲热带、南太平洋岛屿和亚洲的亚热带地区。鸡枞菌肉质细嫩,气味浓香,味道鲜美,营养丰富。现代医学研究证明,鸡枞菌有增强人体免疫功能、预防肠癌、治疗食欲不振,痔疮等功效,因此很有必要对其鸡枞发酵产品做详细的研究。经过植物化学分析表明,在此真菌中主要有多糖,皂甙,脑苷,香豆素,和麦角甾醇等物质。皂甙是鸡枞中的主要活性成分,是极具潜力的天然产物资源之一,受到人们广泛的关注。皂甙是一类具有特殊生理功能的活性物质,具有降血脂、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗自由基、抑制肿瘤细胞生长,免疫调节等作用。本实验研究发酵过程中鸡枞皂甙的变化规律,并建立了简便快速的测定方法,为鸡枞的进一步开发和综合利用提供理论依据和科学参考。工作的主要内容包括:(1)对实验室保存的鸡枞菌株(JNPF-TA01),通过18S rDNA序列分析,并结合ITS rDNA序列分析确定了其在分类学上的地位。该菌株与Termitomyces sp.的18S rDNA序列相似性最高,达到99%。ITS rDNA序列分析结果表明鸡枞菌(JNPF-TA01)与Termitomyces sp. ZA164的ITS rDNA序列相似性达到96%,说明鸡枞菌株(JNPF-TA01)是Termitomyces属的一个种。(2)采用分光光度法测定鸡枞发酵菌丝体中皂甙含量。以人参皂甙Rg1为对照品,在吸收波长为550 nm下,标准浓度在10-240μg范围内,浓度与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为:Y=0.0030X-0.0405,R2 =0.9984。精密度变异系数(RSD)为1.89%,鸡枞菌丝体皂甙类含量为2.69 mg/g菌丝体。本方法操作简单快速,灵敏度高且比较准确,可用于测定鸡枞发酵菌丝体皂甙的含量。(3)在摇瓶的水平上,分别考察了发酵培养基不同组分对鸡枞生长的影响和胞内皂甙产量的影响。通过对发酵培养基碳氮源进行选择及对各主要因素进行单因素实验,得到优化后的培养基组成为(g/L):蔗糖30,酵母粉3,磷酸二氢钾2,硫酸镁1.5;通过对培养条件的考察,发现优化后接种量为10%,转速为150 r/min,装液量为120 mL,温度为28℃,pH为4时,生物量由最初的12.1 g/L提高到15.4 g/L,胞内皂甙产量由最初的28.4 mg/L提高到59.5 mg/L。与优化前的培养基相比,生物量和产物产量均有较大提高,生物量是优化前的1.3倍,胞内皂甙产量是优化前的2.1倍。(4)在5 L发酵罐的水平上,对摇瓶进行了发大实验,优化发酵罐转速条件,在其他实验条件不变外,分别选择转速50 r/min、80 r/min、100 r/min、150 r/min进行实验,得出80 r/min是5 L发酵罐的优化后转速条件。生物量和胞内皂甙产量分别达到最大值15.9 g/L和64.1 mg/L。