【摘 要】
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应激条件下机体会通过多种系统相互作用,使生理功能维持相对平衡,而过度应激可对中枢神经系统、免疫系统与消化系统等产生不利影响。大麻二酚（Cannabidiol,CBD）是工业大麻中（Industrial hemp,IH）含量最多的大麻素之一,众多研究表明CBD具有极好的神经保护、抗抑郁、抗癫痫与免疫调节等功能,但CBD与其他药物或功能成分联合作用研究较少。本文从工业大麻叶中分离纯化得到高纯度CBD晶
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应激条件下机体会通过多种系统相互作用,使生理功能维持相对平衡,而过度应激可对中枢神经系统、免疫系统与消化系统等产生不利影响。大麻二酚（Cannabidiol,CBD）是工业大麻中（Industrial hemp,IH）含量最多的大麻素之一,众多研究表明CBD具有极好的神经保护、抗抑郁、抗癫痫与免疫调节等功能,但CBD与其他药物或功能成分联合作用研究较少。本文从工业大麻叶中分离纯化得到高纯度CBD晶体,通过体外抗应激试验筛选与CBD有最佳协同增效作用的协同因子,通过慢性束缚应激模型研究CBD/花色苷复合物对神经应激的防护作用。通过单因素、PB与响应面试验,以CBD得率为响应值优化了CBD提取工艺参数,确定最优提取参数为乙醇浓度70%,提取温度-20℃,料液比1∶25,提取时间8.25 h,此条件下CBD得率7.51%,THC含量0.28%;优化了热回流、大孔树脂层析、硅胶层析与重结晶四种分离纯化工艺的流动相、固相介质、上样量、流动相流速等参数,制备得到纯度为98.83%的CBD样品,其THC含量低于检出限。以AChE与MAO-A两种酶的抑制率为指标,从15种成分中确定花色苷与CBD具有最佳协同增效作用,其联合作用指数分别为0.94（对于AChE）与0.89（对于MAO-A）;通过反向分子对接分析,预测得到CBD与AChE具有更强的结合作用,其结合能为-7.6 kcal/mol,CBD和MAO-A结合能为-5.5 kcal/mol。通过急性毒性试验,验证了CBD的安全性;对行为学实验与生化指标进行检测,研究了CBD/花色苷复合物对慢性束缚应激小鼠的防护作用,结果表明CBD/花色苷复合物可增强小鼠的学习记忆能力与运动能力,降低血清中皮质酮含量,抑制前额皮层、海马与纹状体中神经细胞凋亡,调节不同脑区中NE、5-HT、DA、AChE及其代谢物水平、抑制各脑区中AChE与MAO-A活性;通过生化指标检测,研究了CBD/花色苷复合物对慢性束缚应激小鼠子代的防护作用,结果表明,CBD/花色苷复合物给药可显著逆转慢性束缚应激诱导的子代小鼠海马和纹状体中神经递质及AChE和MAO-A水平的不利变化。本研究提供从工业大麻中分离纯化CBD的详细工艺参数,研究了CBD/花色苷对慢性束缚应激小鼠及其子代的防护作用,为开发CBD与其他功能成分的有益作用提供参考意义。
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