论文部分内容阅读
目的：利用基因芯片对孕妇外周血浆中胎儿DNA进行定量检测，并对孕妇外周血浆中APC基因的甲基化状态进行研究，进一步预测其应用于无创性产前诊断的潜力。
方法：
1、用酚氯仿法从孕妇外周血浆中提取游离DNA，通过PCR技术检测SRY基因，对胎儿性别进行鉴定；选择前一步实验中SRY基因阳性样本(即胎儿DNA)，利用基因芯片定量检测胎儿DNA，观察妊娠不同时期胎儿DNA浓度的变化，比较正常妊娠和异常妊娠时胎儿DNA含量的差异。
2、从孕妇外周血浆游离DNA中提取APC基因，经过亚硫酸氢钠转化后，利用基因芯片方法检测APC基因启动子区一组CpG位点的甲基化状态，对不同妊娠时期及健康未孕样品进行分析比较。
结果：
1、68例妊娠男性胎儿孕妇血浆中有66例出现SRY基因条带，总符合率97.0％，在所有妊娠女性胎儿的孕妇外周血浆中没有检测到目的条带。
2、对正常妊娠孕妇外周血浆中胎儿DNA含量分析显示：胎儿DNA的含量随着孕期的增长而逐渐增加。对异常妊娠孕妇外周血浆中胎儿DNA含量分析检测显示：妊娠期高血压疾病的孕妇其胎儿DNA含量有明显升高，而唐氏高危的孕妇其胎儿DNA含量没有明显变化。
3、APC基因在健康妇女血浆中是低甲基化或未甲基化的，而在妊娠状态下是高甲基化的，在不同妊娠时期甲基化程度不同；产后样品中，APC基因甲基化消失迅速，方差分析表明其与未孕样品之间差异无显著性(P>0.01)。
结论：
孕妇外周血浆中胎儿DNA含量的变化可以指导产前诊断；基因芯片方法可以高通量的检测胎儿DNA含量及基因启动子区多个甲基化位点的甲基化模式；孕妇外周血浆中DNA甲基化作为一种新的产前诊断标志，必定为无创性产前诊断真正应用于临床发挥重要作用。