论文部分内容阅读
本文利用扫描电镜对松褐天牛Monochamus alternatus Hope及其寄生天敌花绒坚甲Dastarcus longulus Sharp的触角感器超微结果进行了观察,并采用生物化学及分子生物学方法对松褐天牛及其寄生天敌管氏肿腿蜂Scleroderma guani Xiao et Wu的触角气味结合蛋白(Odorant Binding Proteins,OBPs)和化学感受蛋白(Chemosensory Proteins,CSPs)进行了分子克隆与序列分析,结果如下:
1. 利用扫描电镜对松褐天牛触角化学感器观察结果表明,松褐天牛触角上共存在着6种感受器,即毛形感受器(Ⅰ型和Ⅱ型)、Bohm氏鬃毛、锥形感受器、耳形感受器、钟形感受器和角形感受器。对于松褐天牛触角不同种类感器的形态、分布以及雌雄感受器在分布和数量上的差别进行了观察和描述描述。
2. 花绒坚甲的触角扫描电镜观察结果表明,花绒坚甲的触角上主要存在着3种感觉器,分别是毛形感觉器(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型)、刺形感觉器和长针形感觉器。3种毛形感觉器在雌雄两性触角上各节的数量分布并无明显差异,毛形感觉器Ⅱ、Ⅲ型仅存在于触角的最后2节,而尤其以毛形感觉器Ⅲ最为发达,其数量上占有明显优势。
3. 通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现管氏肿腿蜂触角存在三条特异蛋白条带。根据氮端测序结果,设计兼并引物,经YRACE和5RACE技术获得目的片段的全长序列。对全长序列分析表明,其中两个蛋白为气味结合蛋白(OBPs),而另外一个为化学感受蛋白(CSPs),分别被命名为Sgua-OBP1,Sgua-OBP2,和Sgua-CSP1。它们分别编码133、142和129个氨基酸残基序列。信号肽预测结构表明成熟肽N端序列与测序结果一致。序列比对分析显示Sgua-OBP1和Sgua-OBP2与其他昆虫已知的OBPs序列同源,Sgua-CSP1则与已知的昆虫CSPs类蛋白同源。
4. 通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对松褐天牛雌雄虫身体各部位蛋白进行比较分析,发现松褐天牛雄虫触角存在特异表达的蛋白条带。氮端测序后,根据获得的氨基酸序列设计兼并引物,通过3RACE和5RACE技术获得目的片段的全长序列。同源比较得知其属于OBPs类蛋白。编码144个氨基酸序列。