目的:探讨GABA/GABA-A受体通路抑制小鼠树突状细胞迁移功能的机制。方法:在未成熟树突状细胞(Immature dendritic cells,iDCs)中转染GABA-A受体α5亚基SiRNA48小时后,利用WB检测GABA-A受体α5亚基表达水平的变化。然后利用transwell迁移实验检测GABA/GABA-A受体通路对iDCs迁移能力的调控。进一步利用激光共聚焦显微镜观察GABA/GABA-A受体通路对iDCs伪足生成的影响。利用免疫荧光技术和流式细胞技术观察GABA-A受体α5亚基在iDCs膜内外的分布情况,以及在GABA的作用下GABA-A受体α5亚基的内化和再循环。采用免疫共沉淀技术检测在GABA作用下GABA-A受体α5亚基、根蛋白、肌动蛋白是否形成复合物。利用WB检测GABA/GABA-A受体通路对p38 MAPK途径的调控以及对磷酸化丝切蛋白表达水平的影响。结果:1.在iDCs中转染GABA-A受体α5亚基SiRNA 48小时后,α5亚基的表达水平下降,差异具有统计学意义(p<0.05)。2.GABA抑制iDCs的迁移,差异具有统计学意义(p<0.05)。3.GABA抑制了 iDCs伪足的形成。4.在GABA作用下,GABA-A受体α5亚基出现内化,差异有统计学意义(p<0.05)。3h后内化的α5亚基逐渐循环回到膜上。5.在GABA作用下,GABA-A受体α5亚基内化与根蛋白以及肌动蛋白形成免疫复合物。6.GABA/GABA-A受体通路通过抑制p38 MAPK途径来促进磷酸化丝切蛋白表达水平的增高,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:GABA/GABA-A受体通路通过形成免疫复合物抑制p38 MAPK途径来促进磷酸化丝切蛋白表达水平的增高,从而抑制iDCs的迁移能力。