乙烯利诱导的棕色棉子叶衰老及相关基因的差异表达分析

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:zous111
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棉花叶片早衰不仅影响棉花产量,而且会降低棉纤维质量。因此,研究棉花叶片衰老具有重要的理论和实践意义。乙烯作为一种生长调节剂,参与了植物组织衰老及环境胁迫应答。目前,关于乙烯对棕色棉子叶衰老的影响鲜有报道。本研究用乙烯利处理棕色棉幼苗,一方面通过子叶中POD、SOD、CAT活性及MDA含量测定,研究乙烯利对棕色棉子叶衰老的影响;另一方面采用cDNA-SRAP技术,对棕色棉子叶衰老相关基因开展差异表达分析,筛选与棕色棉子叶衰老相关的基因。本研究结果为将有助于进一步了解棕色棉子叶衰老的分子机制。主要研究结果如下:(1)形态学观察发现:不同浓度乙烯利处理棕色棉幼苗子叶,15d后,当乙烯利浓度在250mg.L-1及以下时,子叶颜色与对照比无明显变化,呈现绿色;当乙烯利浓度为500mg.L-1及以上时,与对照相比子叶颜色变黄,显示子叶衰老加快。(2)乙烯利浓度在150mg.L-1及以下时,叶绿素以及类胡萝卜素含量随乙烯利浓度增大都有所上升;当乙烯利处理浓度在250mg.L--1及以上时,叶绿素和类胡萝卜素含量下降,尤其chla含量降低明显,说明250mg.L-1乙烯利已经诱导了棕色棉子叶衰老。(3)乙烯利处理的棕色棉子叶中POD、SOD、CAT活性和MDA含量测定结果表明,当乙烯利浓度在0~1000mg.L-1间变化时,POD、SOD、CAT活性变化规律大致相同,表现为低浓度乙烯利处理酶活性增强;高浓度乙烯利处理酶活性降低。其中,乙烯利浓度为0~50mg.L-1时,CAT、POD酶活性增加明显;乙烯利浓度超过50mg.L-1时,CAT、POD酶活性急速下降;SOD活性在乙烯利浓度为150mg.L-1时最高,当乙烯利浓度超过150mg.L-1时其活性显著下降。在三种保护酶活性变化的同时,MDA含量的也发生相应变化,呈负相关。(4)150、500mg.L-1乙烯利处理棕色棉子叶后,三种保护酶均变现为短时间上升,随后下降,24h时后,500mg.L-1处理组SOD活性低于对照组,而MDA含量明显高于对照组,表明细胞膜脂化严重,衰老加剧。因此,本试验选取500mg.L-1乙烯利处理24h的棕色棉子叶作为基因差异表达分析的材料。(5)通过60对引物组合扩增,获得873条cDNA片段,其中有101条差异条带。之后对重复性较好的32个差异片段进行了克隆和测序。生物信息学分析表明,这些序列分属9大功能类群,均与植物器官衰老、脱落有一定的相关性。
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