【研究背景】食物过敏（Food allergy,FA）和特应性皮炎（Atopic dermatitis,AD）是儿童常见的过敏性疾病,近年来在世界范围内二者的发病率呈上升趋势。虽然临床表现多样,但是二者的发病机制基本相同,为Th2型免疫反应引起的炎症,分别以肠道或皮肤的局部反应为主。大量的研究显示,儿童免疫系统的成熟与肠道菌群密切相关。肠道菌群的延迟定植、结构紊乱或多样性下降等改变,均会影响宿主的免疫稳态和耐受形成,进而诱发过敏性疾病,如食物过敏、特应性皮炎等。基于肠道菌群在过敏性疾病发病中的重要作用,靶向肠道菌群策略对于治疗过敏性疾病具有良好的前景。粪菌移植（Fecal Microbiota Transplantation,FMT）是指将健康人群的肠道菌群移植到疾病人群肠道,通过恢复受者肠道菌群达到治疗相关疾病的目的。目前FMT在治疗艰难梭菌感染等消化道疾病中具有良好的效果,但是关于粪菌移植在过敏性疾病中的应用鲜有报道。本实验通过卵清蛋白（OVA）诱导,建立小鼠FA和AD模型,模拟儿童FA和AD,探讨FMT对小鼠FA和AD的治疗作用及其机制。【研究目的】探索FMT对小鼠食物过敏和特应性皮炎的治疗作用及相关分子通路,并进一步探索FMT对小鼠肠道菌群的影响。【研究方法】1)选用新生BALB/c小鼠,使用OVA致敏和激发,建立食物过敏和特应性皮炎模型;2)取小鼠回肠和皮肤组织进行组织学染色;3)眼球取血收集小鼠血清,检测血清中IL-4、IL-5、IL-13、IL-10、MCPT-1、OVA特异性抗体Ig E、Ig G1的表达水平;4)分离小鼠肠系膜淋巴结及皮肤引流淋巴结,检测Treg细胞数量及表面PD-1的表达水平;5)分离小鼠肠系膜淋巴结及皮肤引流淋巴结,检测CD103+DC数量及表面PD-L1表达水平;6)16S rRNA高通量测序检测小鼠肠道菌群。【研究结果】本研究发现疾病模型组小鼠分别表现出明显的肠道炎症和皮肤炎症,肠道或皮肤组织炎细胞浸润明显,肠道上皮脱落、糜烂,皮肤组织表皮增厚,毛囊退化。血嗜酸性粒细胞百分比显著升高,血清中Th2型细胞因子水平显著升高,OVA特异性抗体水平显著升高,IL-10水平显著降低。肠道和皮肤组织中IL-17,肠道中Ig A水平显著升高。FMT治疗后小鼠的肠道和皮肤炎症减轻,血嗜酸性粒细胞百分比显著降低,血清中Th2型细胞因子水平显著降低,OVA特异性抗体水平显著降低,IL-10水平显著升高。肠道和皮肤组织中IL-17,肠道中Ig A水平显著降低。此外,模型组小鼠肠系膜淋巴结或皮肤引流淋巴结中Treg细胞数量、表面程序性细胞死亡分子1（PD-1）水平、Helios+PD-1+Tregs表达水平显著降低。FMT可上调小鼠肠系膜淋巴结或皮肤引流淋巴结中Treg细胞数量及其表面PD-1表达水平,并增加小鼠肠系膜淋巴结中CD103+DC数量及其表面程序性细胞死亡分子配体1（PD-L1）的表达水平。肠道菌群检测结果显示,疾病模型组小鼠肠道菌群多样性显著降低,菌群的构成也发生了显著改变。FMT治疗后,小鼠菌群多样性升高,菌群的构成也趋近于健康状态,并且菌群的变化与过敏反应及PD-1/PD-L1通路水平具有显著相关性。【结论】FMT可以通过重塑肠道菌群改善小鼠食物过敏和特应性皮炎的疾病状态。本研究发现FMT可以通过调节肠道菌群影响PD-1/PD-L1通路,增加耐受性CD103+DC及Treg细胞的表达,促进免疫耐受的形成,对FA和AD发挥治疗作用。FMT治疗可提高CD103+DC数量,并可能通过PD-1/PD-L1通路诱导Treg细胞的产生,促进免疫耐受的形成和维持,对FA和AD具有一定的治疗作用。FA和AD模型组小鼠的肠道菌群多样性降低,菌群构成较正常组发生了显著改变,而FMT可以逆转这种变化,使菌群趋近于健康状态。FMT治疗在FA和AD小鼠免疫稳态的维持中具有重要作用。