抑制星形胶质细胞活性对氯胺酮作用下大鼠皮层S1区神经元自发电活动的影响

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背景与目的:中枢神经系统中胶质细胞所占比例是70%,现已证实星形胶质细胞可通过多种方式参与神经元传递信息和各脑区神经元信息的整合,进而参与意识的构成。为了说明星形胶质细胞是否参与氯胺酮的全麻效应,本实验借助膜片钳系统来观察抑制星形胶质细胞活性后,氯胺酮对大鼠皮层S1区锥形神经元自发电活动影响的改变。方法:制备SD大鼠(鼠龄10-14天)脑片,采用全细胞膜片钳技术测定自发突触后电流(spontaneous postsynaptic currents,sPSCs)。实验一:记录不同浓度(200μM、400μM、600μM、800μM、1000μM)氯胺酮对大鼠皮层S1区锥形神经元sPSCs的影响,计算半最大效应浓度(EC50);实验二:大鼠随机分为对照组和实验组,对照组大鼠脑片使用正常人工脑脊液孵育,实验组大鼠脑片采用含有5μM氟柠檬酸(fluorocitratse,FC)的人工脑脊液孵育以抑制脑片内星形胶质细胞活性,观察EC50浓度氯胺酮对两组大鼠sPSCs影响差异。结果:1.氯胺酮浓度由低到高对大鼠皮层S1区锥形神经元sPSCs频率的抑制率分别为22.98%±1.70%,40.75%±0.47%,62.37%±2.10%,66.36%±0.59%,73.52±1.23%,提示随着氯胺酮浓度的增加而频率抑制率逐渐增大,且呈浓度依赖趋势。2.氯胺酮浓度由低到高对大鼠皮层S1区锥形神经元sPSCs幅度的抑制率分别为34.72%±0.53%,39.86%±0.92%,45.92%±0.56%,50.94%±0.45%,56.13±0.57%,提示随着氯胺酮浓度的增加而幅度抑制率逐渐增大,且呈浓度依赖趋势,但频率抑制趋势更明显。根据频率抑制的浓度依赖曲线图,计算出EC50为(452.29±41.73)μM,选取450μM作为最佳氯胺酮浓度。3.抑制星形胶质细胞活性后,450μM氯胺酮对大鼠皮层S1区锥形神经元sPSCs频率抑制率降低(P<0.05),但不能对sPSCs幅度产生相同抑制(P>0.05)。结论:1.氯胺酮呈浓度依赖性抑制大鼠皮层S1区锥形神经元sPSCs。2.大鼠皮层S1区内的星形胶质细胞可能参与了氯胺酮对该区域内锥形神经元的抑制作用。
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