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目的:破骨细胞起源于骨髓造血系统的单核/巨噬细胞系,其通过发挥骨吸收作用以维持骨重塑的平衡,使骨骼系统得到持续的更新。一旦破骨细胞的功能失调将会引起多种骨代谢性疾病,如骨质疏松,骨骼石化症等等。近期大量研究报道,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可以通过调控多种细胞生理活动而影响细胞命运,包括增殖、分化、凋亡。然而lncRNA对破骨细胞分化影响的研究尚不够深入。因此,研究破骨细胞分化过程中lncRNA的调节功能及其相关分子机制,将会为骨代谢疾病治疗提供理论依据,并揭示潜在治疗靶点。方法:(1)利用微矩阵描绘出破骨细胞分化过程中表达量发生差异变化的lncRNA和mRNA,进行聚类分析、GO分析和Pathway分析,判定差异基因主要影响的生物学功能或者信号通路。(2)通过生物信息学方法对lncRNA进行筛选,建立小鼠骨髓单核巨噬细胞诱导破骨细胞模型,用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对差异变化lncRNA进行验证。(3)用siRNA干扰技术敲低骨髓单核巨噬细胞长链非编码RNAgm5532(lncgm5532),抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测对破骨细胞形成能力的影响;qPCR技术检测对破骨细胞分化相关mRNA的影响;酶活性检测对抗酒石酸酸性磷酸酶活性的影响;免疫荧光技术检测对破骨细胞骨架蛋白的影响;骨吸收馅窝实验检测对破骨细胞骨吸收功能的影响;CCK8实验检测对破骨细胞前体细胞活力的影响;Western Blotting方法检测对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达量的影响。(4)X射线照射骨髓单核巨噬细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测对破骨细胞形成的影响,qPCR检测lncRNA的表达水平。结果:首先,通过微矩阵分析发现lncgm5532在破骨细胞分化过程中显著上调,进一步通过qPCR得到了验证。其次,敲低lncgm5532后,一方面,破骨细胞的分化和骨吸收均受到抑制,破骨细胞分化相关基因的表达水平和抗酒石酸酸性磷酸酶活性下降,破骨细胞肌动蛋白环的结构受到损伤。另一方面,破骨细胞的增殖也同样受到抑制,同时AKT和ERK的蛋白表达水平下降。最后,诱导分化的破骨细胞中XPR1的表达水平显著身高,而siRNA敲低lncgm5532后,XPR1 mRNA的表达随之下降。并且X射线辐照后虽然不影响破骨细胞的数量,但是破骨细胞的大小明显增加,lncgm5532的表达也出现上调。结论:lncgm5532下调抑制破骨细胞的形成、骨吸收功能以及分化相关基因mRNA表达。lncgm5532下调抑制破骨细胞前体的细胞活力、破坏破骨细胞骨架结构。lncgm5532下调抑制MAPK相关信号通路蛋白表达、抑制XPR1的mRNA水平。X射线辐照能够促进破骨细胞的分化,增加lncgm5532的表达。