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能量负平衡（NEB）是奶牛产后能量摄入无法满足泌乳需求的一种生理失衡的状态,对奶牛生殖健康和繁殖性能产生严重的危害,给集约化牛场带来了很大的经济损失。目前,国内在奶牛泌乳早期NEB与奶牛繁殖性能、卵巢疾病和卵泡发育关系的系统研究较少。因此,本研究通过B超,血液临床病理学和生物统计学等技术探讨奶牛泌乳早期NEB对繁殖的影响,为今后提高奶牛繁殖效率和改善奶牛繁殖力提供理论依据。试验Ⅰ:能量负平衡对奶牛泌乳早期繁殖性能的影响。本试验在黑龙江省某大型集约化牛场选择前胎泌乳量9吨以上的经产荷斯坦奶牛118头作为试验动物。根据产后1421 d血浆BHBA、NEFA和GLU的检测结果及临床表现,分为能量正平衡（PEB）组61头（BHBA<1.2 mmol/L、GLU>2.8 mmol/L）和NEB组57头（BHBA>1.2 mmol/L、GLU<2.8mmol/L）。通过横截面研究方法结合独立样本t检验,皮尔逊相关分析和前瞻性队列研究分析。结果显示:NEB组奶牛产后1421 d BCS、体况损失、乳尿素氮、血浆BHBA和NEFA水平、首次发情天数、输精次数、配准天数和产犊间隔均显著地高于PEB组奶牛（P<0.05）;日均产奶量、乳蛋白和血浆GLU水平、发情次数、发情率和受胎率均显著地低于PEB组奶牛（P<0.05）。其中,体况损失与首次发情天数、输精次数和配准天数呈显著正相关（P<0.05）,与发情次数、发情率和受胎率呈显著负相关（P<0.05）;日均产奶量与输精次数和配准天数呈显著负相关（P<0.05）。此外,泌乳早期NEB与乏情之间呈强的正关联(?2M-H=12.63,P=0.0004),且在产后1421 d经历NEB的奶牛发生乏情的风险是PEB奶牛的3.67倍,表明NEB是奶牛产后乏情率升高的一个重要风险因素。试验Ⅱ:能量负平衡对奶牛泌乳早期卵巢疾病的影响。本试验从试验ⅠPEB组中选择健康对照奶牛22头,NEB组中选择卵泡囊肿奶牛6头、黄体囊肿奶牛6头、卵巢静止奶牛4头。通过非参数检验,斯皮尔曼相关分析,二元逻辑回归结合ROC分析。结果显示:与健康奶牛相比,卵泡囊肿奶牛血浆NEFA和E2水平均显著升高（P<0.05）,血浆ALT、P4和IGF-1水平均显著降低（P<0.05）;黄体囊肿奶牛血浆NEFA和P4水平均显著升高（P<0.05）,血浆Ca、P和Mg水平均显著降低（P<0.05）;卵巢静止奶牛血浆NEFA水平显著升高（P<0.05）,血浆ALT、Ca、P、E2、P4和IGF-1水平均显著降低（P<0.05）。此外,产后1421 d血浆NEFA水平与奶牛卵巢疾病呈显著正相关（P<0.05）,血浆ALT、Ca、P和IGF-1水平与奶牛卵巢疾病呈显著负相关（P<0.05）。确定了奶牛卵巢疾病预警值为产后1421 d血浆NEFA>0.50 mmol/L（敏感度和特异性分别为81.3%和90.9%）、血浆Ca<2.02 mmol/L（敏感度和特异性分别为56.3%和90.9%）。试验Ⅲ:能量负平衡对奶牛泌乳早期卵泡发育的影响。本试验从试验Ⅰ中筛选出PEB组和NEB组奶牛各15头。通过独立样本t检验结合重复测量的方差分析。结果显示:与PEB组奶牛相比,NEB组奶牛血浆中BHBA、NEFA、TG、BUN、GH、IL-6和FGF21水平均显著升高（P<0.05）,血浆中GLU、TC、INS、IGF-1、IGFBP3、LP、BDNF和ANGPTL8水平以及产后5055 d的卵泡生长速度均显著降低（P<0.05）,且E2和P4水平较低,而血浆宏量矿物质浓度无显著变化（P>0.05）。并且,这种差异会一直持续到产后5055 d,从而阻碍了卵泡正常的生长发育。结论:本研究发现泌乳早期NEB会降低奶牛繁殖性能,并证实NEB是奶牛产后乏情率升高的一个重要风险因素,确定了泌乳早期奶牛卵巢疾病发生的风险预警评估指标及其预警值,阐明了泌乳早期NEB抑制产后5055 d卵泡正常生长发育,与NEB引起的能量代谢、激素和组织细胞因子的异常有关。