论文部分内容阅读
目的探讨曲美他嗪对病毒性心肌炎的心肌保护作用及其机制。方法以柯萨奇病毒B3m(CVB3m)诱导的病毒性心肌炎Balb/c小鼠模型为研究对象。274只小鼠随机分为正常对照组(正常组,n=32),病毒性心肌炎组(病毒组,n=80),曲美他嗪药物对照组(药物对照组,n=26),曲美他嗪低剂量治疗组(低剂量组,n=69),曲美他嗪高剂量治疗组(高剂量组,n=67)。正常组和药物对照组腹腔单次无菌注射不含病毒的Eagel’s培养液0.4ml。病毒组与低剂量组和高剂量组腹腔单次接种0.4ml X1×10PFU/mL CVB3m。低剂量组给予曲美他嗪10mg/kg/d,高剂量组给予曲美他嗪20mg/kg/d,病毒组和正常组每天给予等体积饮用水,药物对照组每天给予曲美他嗪10mg/kg/d,分别以灌胃器给药,连续用药2周。攻毒后第3、7、10、14、21天,观察各组生存情况,检测苏木素-伊红染色(H&E)观察心肌组织炎症浸润程度和损害程度,酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清心肌肌钙蛋白工(cTnl)水平,采用黄嘌呤氧化酶法检测血清和心肌组织中SOD(superoxide dismutase)活性,硫代巴比妥酸法测血清和心肌组织中MDA (maleic dialdehyde)含量。PCR方法检测心肌组织(?)as mRNA表达水平。结果病毒性心肌炎小鼠攻毒后第3天开始出现症状,饮水进食减少,体重减轻。随后症状逐渐加重,第4天出现死亡；4-10天为死亡高峰。曲美他嗪高剂量干预后显著提高病毒性心肌炎小鼠的生存率(高剂量组74.6%,病毒组57.5%,P=0.008)。从第7天开始光镜可以观察到明显的病理改变。与病毒组比较,曲美他嗪治疗组明显减轻心肌组织炎症浸润,心肌病理组织学积分在第7、10、14、21天病毒组比正常组明显增高,曲美他嗪治疗组后各时间点病理积分改变较病毒组有所降低。心肌病理组织学积分在第10、14、21天高剂量组较病毒组减少(均P<0.05),在第14、21天低剂量组较病毒组减少(均P<0.05)。高剂量组与低剂量治疗组比较,病理积分在第7、10、14天有减低趋势,但无统计学差异。曲美他嗪两治疗组在各个时间点血清cTnl水平较病毒组显著降低(均P<0.05),而高剂量组较低剂量组cTnI水平显著降低(P<0.01)。曲美他嗪两治疗组血清和心肌组织中SOD的含量提高(均P<0.05),其中,高剂量组较低剂量组SOD提高更明显(均P=0.002)。曲美他嗪两治疗组血清和心肌组织中MDA的含量降低(均P<0.05),其中,高剂量组较低剂量组血清中MDA降低更明显(P<0.05)。曲美他嗪两治疗组Fas mRNA表达较病毒组减少(均P<0.05),高剂量组较低剂量组Fas mRNA表达更少(P<0.01)。结论曲美他嗪能显著提高病毒性心肌炎小鼠的生存率。减少病毒性心肌炎中心肌细胞的损害,减轻心肌组织的病理改变,促进病情缓解。其机制可能与其抗氧化作用以及通过下调fas基因水平抑制心肌细胞凋亡有关。因此,曲美他嗪对病毒性心肌炎小鼠有明显的心肌保护作用。病毒性心肌炎可以从曲美他嗪的治疗中获益。目的激素对治疗病毒性心肌炎的疗效国内外一直存在争议。本研究拟探讨早期大剂量强的松对Balb/c小鼠病毒性心肌炎治疗作用。方法以柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎Balb/c小鼠模型为研究对象。100只小鼠随机分为正常对照组(正常组,n=32),病毒性心肌炎组(病毒组,n=25),强的松低剂量治疗组(低剂量组,n=21),强的松高剂量治疗组(高剂量组,n=22)。低剂量组给予强的松1mg/kg/d,高剂量组给予强的松10mg/kg/d,治疗时间为攻毒后第三天用药；正常组给予等体积饮用水,分别以灌胃器给药,连续用药2周。攻毒后第3、7、14天,观察各组生存情况,检测HE染色观察心肌组织炎症浸润程度和损害程度,ELISA方法检测血清cTnI水平,Real-time PCR方法检测心肌Fas mRNA表达水平。结果病毒性心肌炎小鼠攻毒后第3天开始出现症状,饮水进食减少,体重减轻。随后症状逐渐加重,第4天开始出现死亡；4-10天为死亡高峰。强的松干预后未能提高病毒性心肌炎小鼠的生存率。病毒组小鼠从第7天开始观察到明显的病理改变。心肌炎小鼠血清cTnI增高。强的松治疗组较病毒组可以减少心肌组织病理学积分(均P<0.05)。与病毒组比较,强的松治疗组血清中cTnI明显减低(均P<0.01),其中,高剂量组较低剂量组cTnI明显减低(P=0.007)。与病毒组比较,强的松两治疗组心肌组织Fas mRNA表达明显减低(均P<0.01)。结论不同剂量强的松治疗VMC小鼠,虽然不能改善病毒性心肌炎小鼠生存率,但能改善组织病理学表现,减轻心肌损伤。高剂量强的松治疗与低剂量治疗比较并没有显示出优势。本研究提示强的松对病毒性心肌炎小鼠心肌有一定保护作用。但应用强的松治疗病毒性心肌炎要掌握好激素的剂量。在合适的发病时间应用合适的激素剂量才能起到好的疗效。