雏番鸭坏死性肝炎的病原鉴定及特性研究

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2000年初,本教研组自浙江省的发病鸭场中,采集患番鸭“肝白点病”的肝脾病料,分离到三株病毒,分离的病毒经番鸭胚传代,已传至11代。对其中一株病毒进行了初步的鉴定,结果如下: 实验证实本病毒只对番鸭胚有致死性作用,对鸡胚,鸭胚,鹅胚均不致死。本病毒毒力较强,绒毛尿囊膜接种10倍稀释的尿囊液,0.1ml/胚,致死率达90%以上。本病毒能适应鸡胚成纤维细胞、鸭胚成纤维细胞和鹅胚成纤维细胞,但无明显的细胞病变,在原代细胞上盲传4代,收集细胞液绒毛尿囊膜接种番鸭胚,均能致死。对番鸭胚成纤维细胞适应较好,96小时后细胞产生明显的细胞病变,攻毒鸭康复血清可以抑制细胞病变的产生。感染细胞经丫啶橙染色,胞核内出现黄绿色荧光。病毒的核酸能被DNase Ⅰ完全降解,而不被RNase降解,对S1核酸酶也不敏感。病毒对乙醚,氯仿,胰酶及热处理敏感,本病毒不耐酸,对PH5.0敏感,1M Mg2+对病毒没有热稳定作用。病毒对多种动物的红细胞无凝集作用。中和实验表明该病毒不同于小鹅瘟病毒(GPV),新城疫(NDV),雏鸭肝炎病毒(DHV),鸭瘟病毒(DPV)。细胞培养物的超薄切片观察表明,该病毒在细胞核内复制,胞浆内的病毒粒子呈圆形或椭圆形,大小为80-120nm,病毒经1%醋酸铀负染后,完整的病毒粒子有囊膜,此囊膜在提纯和制样过程中常被破坏或扭曲。 根据病毒的分离,病毒形态大小的观察,理化特性和生物学特性的测定以及核酸类型的测定等结果初步表明该株病毒为疱疹病毒科成员。
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