白芥子挥发油抗肿瘤作用初步研究

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本文阐述了异硫氰酸盐(ITCs)的来源、种类、理化性质、防癌抗癌研究概况以及ITCs的一些其它作用。进行了白芥子挥发油提取工艺的优化,并对其化学成份进行鉴定;观察白芥子挥发油对肝癌H22细胞以及小鼠肝癌H22移植性肿瘤的抑制作用,并初步探究其作用机制,为白芥子挥发油的开发利用提供新的思路。本文以L9(34)正交设计试验优化白芥子挥发油的提取工艺,并通过GC-MS气质联用法分析其化学成份;采用台盼蓝染色排染法以及MTT法检测白芥子挥发油对小鼠肝癌H22细胞的体外抑制作用,采用DNA琼脂糖凝胶电泳法以及流式细胞仪PI单染法检测白芥子挥发油对H22细胞凋亡与细胞周期的影响;通过建立小鼠肝癌H22腹水瘤模型和实体瘤模型观察白芥子挥发油对小鼠肝癌H22的体内抑制作用,并通过HE染色法观察细胞形态的变化,检测胸腺、脾脏指数探究白芥子挥发油的毒副作用,并采用丫啶橙染色观察肿瘤细胞凋亡的特征,采用免疫组织化学方法检测白芥子挥发油对小鼠肝癌H22实体瘤凋亡基因Bax、Bcl-2表达的影响。结果表明白芥子挥发油最佳提取条件为:水解温度50℃、缓冲液pH值为5.0、抗坏血酸浓度为0.5mmol/L,挥发油提取率可达0.164%,所提取挥发油主要成份为异硫氰酸烯丙酯(89.411%);白芥子挥发油在体外对小鼠肝癌H22细胞的生长有显著的抑制作用,其抑制作用可能是通过细胞凋亡来实现;白芥子挥发油对小鼠肝癌H22腹水型小鼠具有一定的生命延长作用,且对小鼠肝癌H22实体瘤也有着显著的抑制作用,呈现良好的剂量-效应关系,但大剂量给药组毒副作用明显;白芥子挥发油可能通过上调Bax表达与下调Bcl-2表达,提高Bax/Bcl-2比率以促进肿瘤细胞凋亡。
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