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目的:1.以缺血性脑卒中患者为研究对象,比较通督调神组和常规针刺组两种治疗方法对脑卒中患者的NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分的影响及临床疗效,从而为提高缺血性脑卒中的临床疗效和优化针灸方案提供临床依据。2.本实验以改良的Zea-Longa法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO/R模型),观察分析通督调神组、常规针刺组、通心络组三种治疗方法对MCAO/R模型大鼠缺血皮质区VEGF、MMP-9表达影响的差异,探究通督调神针灸法对MCAO/R模型大鼠脑保护的作用机制,为临床研究提供科学依据。方法:1.临床研究选择2013年10月到2014年12月在安徽中医药大学第二附属医院住院治疗的CIS患者66例,按照患者来院诊疗的先后顺序,采用随机数字法将患者分为通督调神针刺组(A组),常规针刺组(B组),每组33例。两组患者均在药物基础治疗的前提下,分别给予通督调神针法和常规针刺法治疗。基础治疗所选药物参照《中国脑血管病防治指南》(卫生部疾病控制司中华医学会神经病学会,2005)的方案。通督调神组治疗方法为:取穴为百会(悬灸)、大椎(刺络放血)、合谷、风池、足三里、曲池、三阴交。辨证配穴:肝阳上亢者加太冲、太溪;风痰阻络者加外关、丰隆;痰热腑实者加丰隆、间使;气虚血瘀者加气海、血海;阴虚风动者加太溪、复溜;痰湿蒙神者加关元、丰隆。常规针刺组治疗方法为:取穴为合谷、风池、足三里、曲池、三阴交,辩证配穴同通督调神组。两组治疗均为,每日一次,每次留针30分钟,每隔15分钟行针1次,共治疗14天。治疗前后均进行NIHSS评分、MESSS评分和ADL评分检测;数据统计采用SPSS17.0统计软件分析。2.实验研究2.1实验动物:选择清洁级雄性SD大鼠200只,1周适应性喂养。2.2制备脑缺血再灌注模型:根据改良的Zea-Longa线栓法制备模型大鼠。2.3动物分组:从200只大鼠随机取30只作为假手术组,余170只进行造模。造模后,选择造模成功且神经功能评分合格的大鼠,电脑随机区组分为四组,分别是通督调神组、常规针刺组、通心络药物组、模型组,每组30只。2.4治疗方法:通督调神组:艾灸百会穴,每日一次,每次30min,大椎穴刺络放血,隔天一次,放血每次1-3滴。选取曲池、合谷、风池、足三里、三阴交穴进行针刺,每天1次;常规针刺组:选取曲池、合谷、风池、足三里、三阴交穴进行针刺,每天1次;通心络组:予以通心络胶囊灌胃,每日一次,每次每只0.2mg/kg.d,每次4ml;模型组和假手术除给予生理盐水灌胃外不做任何治疗。以上各组大鼠均给予生理盐水灌胃,每日一次,每次4ml。其他治疗,每日一次,7天一疗程,4个疗程结束治疗。2.5模型大鼠行为功能评分:治疗前和完成全部疗程治疗后,分别参照Bederson等制定的标准进行神经功能评定。2.6免疫组化方法检测:在治疗的第7、14、21、28天,每组随机取5只大鼠,处死、断头、取脑,石蜡包埋,切片染色,通过免疫组化法检测缺血皮质区VEGF、MMP-9的阳性灰度值。2.7统计学分析:采用SPSS17.0统计软件进行数据处理。所有数据均以均数±标准差表示,P>0.05表示差异无统计学意义。P<0.05表示统计学有显著性差异,P<0.01表示统计学上有显著性差异。结果:1临床研究1.1治疗前,两组患者的的年龄、性别、病程、NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分的差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。1.2治疗前后,通督调神组患者的NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分有显著性差异(P<0.05),常规针刺组患者的NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分有显著性差异(P<0.05)。治疗后,通督调神组和常规针刺组之间的NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分均有显著性差异(P<0.05),说明通督调神组和常规针刺组对CIS患者的NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分均有干预作用,通督调神针组优于常规针刺组。2实验研究2.1在治疗前,模型组、通心络组、普通针刺组、通督调神组各组间神经行为学评分差异无统计学意义(P>0.05);全部疗程结束后,通心络组、普通针刺组、通督调神组、模型组大鼠的神经行为学评分均降低。治疗后,与假手术组相比,模型组神经行为学评分非常显著性差异(P<0.01),通心络组、普通针刺组、通督调神组神经行为学评分有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,通心络组、普通针刺组神经行为学评分具有显著性差异(P<0.05),通督调神组神经行为学评分有非常显著性(P<0.01);与通心络组相比,常规针刺组大鼠神经行为学评分有显著差异(P<0.05),通督调神组神经行为学评分有非常显著性差异(P<0.01)。说明通心络药物组、常规针刺组、通督调神组均能使模型大鼠神经行为学评分降低,且通督调神针组效果优于通心络组和常规针刺组。2.2治疗的第7天、14天、21天、28天,各组大鼠缺血区皮质区VEGF、MMP-9的阳性灰度值变化如下:(1)假手术组、模型组前后变化差异无统计学意义(P>0.05)。第7天:与模型组相比,通心络组、常规针刺组、通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与通心络组相比,常规针刺组有显著性差异(P<0.05),通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与常规针刺组比,通督调神组有显著性差异(P<0.05)。第14天:与模型组相比,通心络组、常规针刺组、通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与通心络组相比,常规针刺组有显著性差异(P<0.05),通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与常规针刺组比,通督调神组有显著性差异(P<0.05)。第21天:与模型组相比,通心络组、常规针刺组、通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与通心络组相比,常规针刺组有显著性差异(P<0.05),通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与常规针刺组比,通督调神组有显著性差异(P<0.05)。第28天:与模型组相比,通心络组、常规针刺组、通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与通心络组相比,常规针刺组有显著性差异(P<0.05),通督调神组有非常显著性差异(P<0.01);与常规针刺组比,通督调神组有显著性差异(P<0.05)。结论:1.临床研究1.1通督调神针组和常规针刺组均对缺血性脑卒中患者NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分具有干预作用。1.2在改善NIHSS评分、MESSS评分及ADL评分方面,通督调神组优于普通针刺组。说明通督调神针法可以减少患者神经功能缺损,提高患者生活质量,可在临床推广。2实验研究2.1通督调神组、常规针刺组和通心络组均对MCAO/R模型大鼠神经行为学评分有明显的干预作用。通督调神组优于常规针刺组,常规针刺组优于通心络组,提示,通督调神针法更有效促使MCAO/R模型大鼠神经功能恢复。2.2通心络组、常规针刺组、通督调神针刺组三种治疗方法均能干预MCAO/R模型大鼠缺血皮质区VEGF、MMP-9的相对表达。通督调神组优于常规针刺组,常规针刺组优于通心络组。2.3通督调神针法能有效促进MCAO/R模型大鼠神经功能的恢复,其机制可能是通过上调缺血区VEGF的表达,促进血管新生改善脑血流量,抑制MMP-9的表达,减轻炎症反应,保护血脑屏障,减轻脑水肿,保护神经元而起作用。