狂犬病病毒荧光抗体病毒中和试验实验室检测方法的建立及应用

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xzy200611519
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狂犬病是一种病死率极高的人兽共患传染病,我国是狂犬病的高发地区。近年来,随着狂犬病日趋严重,动物狂犬病的大规模免疫计划已纳入日程,但目前我国尚缺乏狂犬病免疫检测和效价评价的可靠手段。本研究旨在建立一种狂犬病病毒血清中和抗体效价的实验室检测标准方法,即荧光抗体病毒中和试验(FAVN),并该方法初步应用于狂犬病免疫检测及疫苗免疫效果评价。首先,使用实验室前期获得的抗狂犬病病毒核蛋白单抗,制备异硫氰酸荧光黄标记荧光抗体;利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以国际兽疫局标准品进行标定;参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,两次结果一致。以K?ber法公式和Microsoft Excel软件为基础,设计被测样品中和效价计算方法,该计算方法操作简便、快捷。然后,依据建立的FAVN法对来自我国部分城市和农村地区,以及本实验室研制疫苗免疫的犬、猫等动物的血清样品进行了检测,测定结果为当地狂犬病预防及时提供了准确的免疫监测数据,也为疫苗免疫效果做出了定量评价。
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