【摘 要】
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长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)在骨骼肌生长发育的表观遗传调控中起着重要作用。在本课题组的前期RNA测序中,我们发现了一个在隐性白羽洛克鸡和杏花鸡间差异表达
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长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)在骨骼肌生长发育的表观遗传调控中起着重要作用。在本课题组的前期RNA测序中,我们发现了一个在隐性白羽洛克鸡和杏花鸡间差异表达的lncRNA(lncRNA-Six1)。在本研究中,我们进一步发现lncRNA-Six1位于蛋白编码基因Six1基因的上游432 bp处,与Six1基因的近端启动子重叠。由lncRNA-Six1编码产生的一个约7.26 kDa的微肽可富集于Six1基因的启动子活性区域,是lncRNA-Six1顺式调控Six1基因所必需。过表达lncRNA-Six1促进Six1基因mRNA和蛋白质水平的表达;反之,干扰lncRNA-Six1使Six1基因的表达受到抑制。组织表达谱分析发现,lncRNA-Six1和Six1基因均在胸肌组织中表达量较高。利用EdU染色、流式细胞术检测细胞周期和CCK-8试验,证实lncRNA-Six1可通过靶向调控Six1基因,促进细胞增殖、诱导细胞分裂。此外,体外诱导鸡原代成肌细胞分化,qRT-PCR检测发现,lncRNA-Six1和Six1基因均在增殖及分化后各时期表达量有所提高。Six1基因可通过调控骨骼肌生长相关基因(MYOG、MyHC、MYOD、IGF1R及INSR)的表达,影响骨骼肌的生长发育。综上所述,lncRNA-Six1可通过编码一个微肽,顺式调控Six1基因的表达,促进细胞增殖,参与骨骼肌生长发育的调控。
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