论文部分内容阅读
对外源化合物致突变性的快速筛检以及遗传毒性的准确评价一直是毒理学领域的重点研究课题。本研究的目的是建立基于人类细胞系(人的类淋巴母细胞TK6细胞)的一组快速灵敏的体外遗传毒性测试方法(TK基因突变试验、体外微核试验、彗星试验),并用此方法对双酚A(Bisphenol A,BPA)和壬基酚(4-Nonylphenol,NP)的遗传毒性进行较为全面的测试和评价,为BPA和NP的安全性评价提供毒理学资料,同时也为TK基因突变试验、体外微核试验和彗星试验在化合物以及新药和新开发食品原料成分遗传毒性快速筛检中的推广应用积累资料。 在TK基因突变试验中,分别以100μM、150μM、200μM、250μM BPA和50μM、60μM、70μM、80μM NP处理4h,表达培养3d,测定TK6细胞处理结束时的平板接种效率(PE0)和表达结束时的平板接种效率(PE3)及TFT(三氟胸苷)抗性突变频率(MF)。结果显示,BPA四个剂量组诱导的MF与溶剂对照组相比均无显著性差异;NP在70μM和80μM剂量组MF与溶剂对照组比较显著增加(P<0.05),分别达到溶剂对照的的2.46倍和3.83倍,但各剂量组间无剂量反应关系,NP在70μM和80μM浓度时,细胞相对存活率分别为13.63%和4.97%,提示NP诱导的MF增加可能与较强的细胞毒性有关。 在微核试验中,分别以BPA(100～250μM)、NP(50～80μM)处理4h和BPA(50～125μM)、NP(40～70μM)处理48h,并通过Giemsa和吖啶橙(A.O)两种染色方法,测定TK6细胞的微核细胞率。4h处理的微核率测定与TK基因突变试验采用同一培养物,其采样时间为TK基因突变试验处理结束后48h。结果显示,BPA和NP对处理后的TK6细胞的微核率均无明显影响,但两种染色的微核率有显著性差异(P<0.05),A.O染色的微核率高于Giemsa染色,提示A.O染色对微核的检测更为灵敏。 彗星试验结果显示,分别以BPA(50μM、100μM、200μM)和NP(2.5μM、