不同产地菊芋叶片中绿原酸含量变化及其提取、分离技术研究

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菊芋(Helianthus tuberosus L.)原产于北美,为菊科(Compositae)向日葵属多年生草本植物。菊芋叶片中含有大量的化学成分,主要是酚类和倍半萜内酯类化合物,绿原酸类化合物是该植物叶片中的重要生理活性成分,具有清热解毒、保肝利胆、抗菌消炎、抗诱变等多种药用功能,有着良好的发展前景。近年来对绿原酸的研究主要集中于金银花和杜仲叶等植物中绿原酸的提取纯化、含量测定、结构鉴定及药理作用等方面,而对菊科向日葵属植物菊芋叶片中绿原酸类化合物的研究少有报道,本文探索了采用HPLC法检测菊芋叶片中绿原酸的条件,优化了提取方法并采用大孔吸附树脂对绿原酸物质进行分离,实验结果如下:1、建立了菊芋叶片中绿原酸的HPLC检测方法高效液相色谱法的检测条件是:色谱柱:Agilent C18(4.6x150mm,5μm);检测波长:327nm;流动相:1%磷酸溶液:乙腈=87:13;流速:1ml/min;柱温:30℃;进样量:5μl。该方法简便、快速、准确,可用于菊芋叶片中绿原酸含量的测定。2、研究了菊芋叶片中绿原酸的提取工艺条件,比较了提取方法、提取试剂、提取温度、提取时间和固液比等因素对绿原酸含量的影响。在提取温度、时间、固液比的单因素试验基础上,采用正交试验法优化了菊芋叶片中绿原酸的提取工艺。试验结果表明最佳提取工艺为:回流提取法,提取试剂为70%甲醇,提取温度80℃,提取时间2.5h,固液比1:25,认为该研究结果可为利用菊芋叶片工业化生产绿原酸提供科学依据。3、研究了大孔吸附树脂分离绿原酸的条件,分别考察了树脂的静态吸附率和解析率,比较研究了上样液浓度、流速、pH值对吸附率的影响,以及洗脱液浓度和流速对解析率的影响,绘制了洗脱曲线。试验结果表明,NKA-2型大孔吸附树脂有较好的吸附率和解析率,在上样液浓度为0.11mg/ml、流速为2.0ml/min、pH值为2.0时.NKA-2型树脂有最佳的吸附效果,当洗脱液为40%乙醇、流速为0.5ml/min时,NKA-2型树脂有最佳的解析效果,洗脱曲线表明用50ml的洗脱液就可以基本将绿原酸洗脱下来,且洗脱峰较为集中。4、分别测定了大丰地区3个菊芋品种各自的3个生长期及大庆地区2个菊芋品种叶片中的绿原酸含量。试验结果表明,大丰地区南芋10号在不同生长期均有较高的绿原酸含量,而采自大庆地区的菊芋叶片样品中绿原酸含量明显高于大丰地区。相比之下,大庆地区南芋1号有最高的绿原酸含量,为叶片干重的2.139%,表明菊芋叶片中绿原酸含量在不同品种、不同生长期以及不同生态区域内有差异,为菊芋叶片资源的进一步开发利用提供了依据。
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