再生医学中细胞移植治疗是非常有前景的手段,为一些无法治疗的疾病提供了新的治疗手段。人类多能干细胞（hPSCs）为细胞移植治疗提供了细胞来源,因为它具有自我更新以及在合适的诱导环境下可以分化为几乎任何类型的人体细胞的能力。但是在人胚胎干细胞作为细胞来源的细胞移植疗法迈向临床的过程中,其复杂免疫原性极大地阻碍了进一步的发展。人诱导多能干细（hiPSCs）虽然提供了适用于自体移植的细胞来源,但是诱导多能干细胞的免疫原性目前存在争议,并且存在异质性,非完全重编程等问题,常用的免疫耐受药物会诱导全身的免疫系统抑制,长期使用必然会增加炎症,肿瘤的风险。前期研究结果显示,hPSCs中表达免疫耐受因子CTLA4Ig和PDL1能够在移植后诱导局部的免疫耐受微环境,但是这种免疫耐受策略因为是组成型表达免疫耐受因子,仍然具有成瘤的安全性风险。针对这个问题,本研究试图利用基因编辑系统构建基因修饰的人胚胎干细胞系,我们利用CRISPR/Cas9将免疫耐受因子定点插入到肝脏特异性基因ALB位点,受到内源ALB基因启动子的控制,从而构建了肝脏谱系选择性免疫耐受细胞系。同时我们也构建了组成型表达CTLA4Ig和PDL1的组成型免疫耐受人胚胎干细胞系。这两种细胞系都能够高效诱导分化为肝脏细胞,效率与野生型人胚胎干细胞相似。随后我们分析了免疫耐受因子的表达模式,结果显示肝脏细胞选择性免疫耐受细胞系中,免疫耐受因子的表达严格限制在成熟的肝脏细胞中,并同ALB基因表达模式是一致的,这证明免疫耐受因子成功的特异表达于肝脏细胞中。当把组成型和肝脏细胞选择性免疫耐受细胞系移植到人源化小鼠中以后,我们发现组成型免疫耐受细胞系因为诱导了免疫耐受,所以生长了体积很大的畸胎瘤,而肝脏细胞选择性免疫耐受细胞系则只能够生长出体积非常小的畸胎瘤,因为免疫系统的攻击影响了畸胎瘤的生成。我们对畸胎瘤进行了组织病理学分析发现一部分选择性免疫耐受细胞系来源的畸胎瘤里面有大量的坏死组织,而组成型免疫耐受细胞系来源的畸胎瘤中则没有。进一步用CD3、CD4、CD8将畸胎瘤切片染色发现肝脏谱系选择性免疫耐受细胞系来源的畸胎瘤中有大面积的T细胞的浸润情况,而组成型免疫耐受细胞系来源的畸胎瘤中则只有小面积的T细胞的浸润情况。这些结果都证明,CTLA4Ig和PDL1免疫耐受组合能够在人胚胎干细胞移植中诱导免疫耐受,而我们利用基因编辑工具构建的选择性免疫耐受系统更加安全可控。本研究探讨了细胞移植治疗中免疫耐受诱导问题,提出了选择性免疫耐受概念,为再生医学中移植细胞的制剂化提供了技术支持。