背景以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitors,EGFR-TKIs）为代表的靶向药物开启了肺癌的精准治疗时代,将晚期非小细胞肺癌（Non Small Lung Cancer,NSCLC）患者生存期明显延长。目前已有奥希替尼（Osimertinib）等第三代EGFR-TKIs进入临床,虽然疗效显著,但患者仍会耐药,且耐药机制复杂,目前尚未完全阐明,耐药后处理亦是临床治疗难点。因此我们思考,奥希替尼耐药后行病理活检及分子检测,根据耐药机制制定进一步的治疗方案可否延长患者生存期。方法本研究第一部分收集广东省人民医院肺癌研究所2017年到2020年对二线及以后线奥希替尼耐药的NSCLC患者的临床信息,根据耐药后是否行组织活检及二代测序（Next Generation Sequencing,NGS）分为及再活检组和无再活检组,再活检组依据患者病理类型及分子特征确定下一线治疗方案,无再活检组则予以化疗、最佳支持治疗等处理。我们比较了两组奥希替尼耐药后下一线治疗方案的无进展生存期（post-Progression Free Survival,pPFS）,两组总生存期（post-Overall Survival,pOS）等数据。本项研究的第二部分依据奥希替尼耐药前后NGS检测结果,分析了奥希替尼耐药前后分子特征。部分患者在奥希替尼的后续治疗耐药后再次行NGS检测,我们分析了这些患者EGFRT790M突变丰度变化,并考察了 EGFR T790M突变丰度升高患者进行奥希替尼再挑战的可能性。本研究的第三部分,我们利用奥希替尼耐药后患者肺癌组织建立了类器官模型,进行了抗癌药物的敏感性试验,并根据试验结果在临床实践中验证药敏试验方案的疗效。结果本研究首先比较了奥希替尼耐药后再活检组和无再活检组患者的生存数据,明确依据分子分析联合病理类型分析所制定的治疗方案可以提高患者的无进展生存期和总生存期,由此确定了联合检测对于制定治疗方案的意义。本研究根据患者治疗全程的多次NGS检测结果,分析发现EGFRT790M突变丰度增高的患者,再次接受奥希替尼治疗有获益趋势。肺癌类器官药敏试验显示,依据联合检测制定的方案对患者类器官有效,从机制方面明确了联合检测组具有治疗优势的原因。以此为基础,创立了分子检测联合类器官药敏试验的临床实践模式,对减少原发耐药,改善患者生存期及节约经济消耗有积极意义。结论二线及以后对奥希替尼耐药的晚期非小细胞肺癌患者,基于NGS检测和病理活检的结果制定的后续治疗方案可改善此类患者的生存期;奥希替尼耐药并经后续治疗后EGFR T790M突变丰度增高的患者,再次接受奥希替尼治疗可能获益。类器官模型及药敏试验明确联合检测方案有效的机制,并减少原发耐药的几率。