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急性胰腺炎（Acute pancreatitis,AP）是消化系统常见的危重性疾病,发病率逐年升高,易发生各种严重合并症,重症患者病死率居高不下,是临床医学的严峻挑战。中医在临床治疗AP方面具有独特优势,根据其湿热瘀滞、腑气不通的主要病机,明确通腑泄浊、活血散瘀、行气止痛的治则,应用中医药可以控制并发症并减轻腹痛等症状。大黄牡丹汤（Dahuang Mudan Decoction,DMD）是中医经典方剂,长期以来在AP临床治疗中效果明显,然而其发挥有效干预作用的具体机制不甚明晰。因此紧密联系临床实际,解决大黄牡丹汤作用机制和治疗靶点不明确的问题,具有明确现实意义和价值。本研究旨在探讨HMGB1/TLR4/NF-κB和HMGB1/RAGE/AKT信号通路关键分子在大鼠AP模型中的表达变化,以及大黄牡丹汤对通路中效应分子表达的影响,从“炎症”和“凋亡”角度揭示大黄牡丹汤有效干预AP的作用机制,获得以下成果:1.采用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法复制大鼠AP模型,观察模型组大鼠生存状态,检测血清生化指标,观察胰腺病理组织切片评估模型复制情况。发现与空白组比较,模型组大鼠造模后一般生存状况较差,表现为眯眼、被毛杂乱失泽、倦卧嗜睡等症状;血清淀粉酶（Amylase,AMS）、谷丙转氨酶（Alanine transaminase,ALT）、谷草转氨酶（Aspartate Transaminase,AST）、C-反应蛋白（C-reaction protein,CRP）含量显著升高,胆碱酯酶（Cholinesterase,Ch E）含量显著降低（P＜0.05）;病理组织学观察发现,模型组大鼠的胰腺腺泡细胞大量坏死,小叶导管结构模糊,叶间隔明显增宽,可见大量充血、水肿以及炎性细胞浸润。结果表明大鼠AP疾病模型复制成功。2.通过检测血清生化指标,观察大鼠胰腺组织病理学和超微结构变化,分析大黄牡丹汤干预大鼠AP的整体效果。发现与模型组比较,各给药组大鼠AMS、ALT、AST、CRP含量均下降,Ch E含量升高,其中尤以大黄牡丹汤高剂量组最为显著（P＜0.05）。各给药组大鼠胰腺组织存在程度不同的腺泡细胞坏死,小叶导管结构模糊,叶间隔增宽情况,可见出血以及炎性细胞浸润,但均较模型组不同程度减轻,尤以大黄牡丹汤高剂量组显著。各给药组大鼠腺泡细胞的核膜形状变化及结构缺损,粗面内质网结构散乱,线粒体肿胀透明等情况均有不同程度改善,尤以大黄牡丹汤高剂量组干预效果明显。表明大黄牡丹汤能够调控血清AMS、ALT、AST、Ch E、CRP含量,对胰腺组织损伤有改善作用,对AP病程有积极影响。3.通过实时荧光定量聚合酶链反应、免疫蛋白印迹、免疫组织化学法分别检测HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路关键分子基因蛋白表达及相关蛋白磷酸化水平,并采用酶联免疫吸附试验检测胰腺组织中相关炎症因子的含量。发现与空白组比较,模型组大鼠胰腺组织中高迁移族率蛋白B1（High mobility group protein,HMGB1）、Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）、髓样分化因子88（Myeloid differentiation factor 88,MYD88）、白细胞介素-1受体相关激酶2（Interleukin-1receptorassociated kinase 2,IRAK2）、白细胞介素-1受体相关激酶4（Interleukin-1 receptorassociated kinase 4,IRAK4）、核因子κB（Nuclear factor kappa-B,NF-κB）基因蛋白表达以及相关蛋白磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,各给药组大鼠胰腺组织中HMGB1、TLR4、MYD88、IRAK2、IRAK4、NF-κB基因蛋白表达以及相关蛋白磷酸化水平均不同程度降低,其中尤以大黄牡丹汤高剂量组最为显著（P＜0.05）。与空白组比较,模型组大鼠胰腺组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-2（Interleukin-2,IL-2）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）、诱导型一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase,i NOS）、γ干扰素（Interferon-γ,IFN-γ）含量均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,各给药组大鼠胰腺组织中TNF-α、IL-6、IL-2、IL-1β、i NOS、IFN-γ含量均不同程度降低,其中尤以大黄牡丹汤高剂量组最为显著（P＜0.05）。表明AP以炎症为主导的病理改变机制与HMGB1/TLR4/NF-κB通路响应所介导的炎症级联反应关系密切,大黄牡丹汤能够该抑制该信号通路关键分子基因蛋白表达,减轻胰腺组织炎症反应。4.采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫蛋白印迹和免疫组织化学法检测HMGB1/RAGE/AKT信号通路关键分子基因蛋白表达及相关蛋白磷酸化水平。发现与空白组比较,模型组大鼠胰腺组织中糖基化终产物受体（Receptor for advanced glycation endproducts,RAGE）、磷酯酰肌醇-3-激酶（Phosphatidylinositol3 kinase,PI3K）、蛋白激酶B（Protein Kinase B,AKT）、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2）基因蛋白表达显著升高,半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 Associated X Protein,Bax）基因蛋白表达显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,各给药组大鼠胰腺组织中RAGE、PI3K、AKT、Bcl-2基因蛋白表达均不同程度降低,Caspase-3、Bax基因蛋白表达不同程度升高,其中尤以大黄牡丹汤高剂量组最为显著（P＜0.05）。表明大鼠AP模型胰腺腺泡细胞凋亡被抑制,可能与AP发病后剧烈的炎性坏死有关,而大黄牡丹汤能够显著抑制HMGB1/RAGE介导的PI3K/AKT途径活化,进而促进腺泡细胞凋亡进程,减轻炎性坏死,进而发挥胰腺保护作用。本研究通过复制大鼠AP模型并开展相关试验,证明大黄牡丹汤能够从“炎症”“凋亡”两条信号通路途径对大鼠AP模型进行干预,结果在一定程度上明确了大黄牡丹汤在AP临床治疗中的作用机制和治疗靶点,充实了该方剂临床应用的理论依据,为进一步探讨该方及相关中医理论提供了基础支撑。