炭疽芽胞杆菌A16R BA5641及lysA基因功能研究

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炭疽芽胞杆菌引起的炭疽病是五大人畜共患病之一,危害性极强,对世界各地的人类健康及畜牧业都构成了严重威胁。炭疽芽胞杆菌能导致皮肤炭疽、肺炭疽、肠道炭疽等疾病。炭疽芽胞杆菌还被用作生物战剂和制造生物恐怖,危害社会稳定。本研究利用同源重组原理构建了A16R△BA5641::spc和A16R△lysA::spc菌株。测定了A16R及其突变株A16R△BA5641::spc和A16R△lysA::spc的生长曲线,比较了它们在糖代谢方面的差异;制备了A16R与突变株A16R△BA5641::spc的芽胞蛋白样品,完成其双向电泳图谱,比较了A16R与突变株A16R△BA5641::spc芽胞的差异蛋白,经取点、质谱鉴定得到了其差异蛋白的信息,之后又分析了差异蛋白;另外还比较了在诱导剂存在下两者芽胞萌发的情况。综上所述得出如下结果:1.利用Cre-loxp系统成功构建了炭疽芽胞杆菌疫苗株A16R的突变株A16R△BA5641::spc和A16R△lysA::spc。2.A16R及其突变株A16R△BA5641::spc、A16R△lysA::spc在糖代谢方面没有差别,但BA5641缺失株生长更好一些。3.比较蛋白质组学分析A16R及其突变株A16R△BA5641::spc的差异蛋白,结果发现3个差异较大的蛋白,其中一个与蛋白质的合成有关,一个是过氧化氢酶,还有一个是蛋白折叠相关的分子伴侣。4.基因BA5641在炭疽芽胞杆菌的四种萌发途径中都起到一定的作用,该基因的缺失导致芽胞萌发速率明显受到抑制。
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