胃溃疡的发生与胃黏膜上皮细胞的凋亡相关,临床研究发现,黄芪甲苷和蒙药-黑冰片均能够有效治疗胃溃疡,而黑冰片的有效药效成分至今仍未阐明。本课题主要通过研究黑冰片及其碳纳米颗粒成分对Fas/FasL细胞凋亡通路介导的小鼠胃溃疡的影响,从而确定黑冰片治疗胃溃疡的药效学成分,为后续探讨黄芪甲苷与碳纳米颗粒的联合效应奠定基础。首先,在细胞水平建立损伤性胃黏膜上皮细胞模型,研究各种药物对模型细胞的毒性、Fas/FasL凋亡通路中细胞凋亡相关基因的表达以及Caspase-3蛋白活性的影响;其次,在动物水平上,研究各种药物对小鼠脾脏T淋巴细胞FasL的表达以及小鼠胃黏膜组织完整性的影响;最后,分别在细胞和动物水平上,探讨黄芪甲苷与碳纳米颗粒的联合效应对Fas/FasL m RNA和蛋白表达、Fas/FasL凋亡通路中的细胞凋亡相关基因的表达以及小鼠胃黏膜组织完整性的影响。实验结果表明:(1)细胞水平研究结果表明:黄芪甲苷和黑冰片均可通过显著调节乙醇诱导后的胃黏膜上皮细胞凋亡相关基因Fas、Bax、BcL-2的表达以及Caspase-3的活性,从而达到对炎症胃黏膜上皮细胞的恢复作用;在三种碳纳米颗粒的研究中,发现除了富勒烯之外,氧化石墨烯和羧基化单壁碳纳米管均对乙醇诱导后胃黏膜上皮细胞具有一定的恢复效果。(2)动物水平研究结果表明:黑冰片能够显著下调小鼠脾脏T淋巴细胞FasL的表达,而组织切片的结果亦表明黑冰片对小鼠胃黏膜组织具有较好的保护作用。在三种碳纳米颗粒的研究中,我们发现氧化石墨烯与黑冰片有着相同效果;而羧基化单壁碳纳米管则与黑冰片的作用相反,不仅对胃黏膜组织无保护作用,反而可能会促进胃黏膜组织的损伤;富勒烯的作用效果不显著。这些结果表明,氧化石墨烯可能在黑冰片对胃溃疡的治疗中发挥主要作用。(3)黄芪甲苷与碳纳米颗粒的联合效应结果表明:黄芪甲苷联合氧化石墨烯能显著降低乙醇诱导后的胃黏膜上皮细胞的Fas蛋白的表达,同时能够显著调节其凋亡相关基因Fas、Bax、BcL-2的表达以及Caspase-3活性,而与富勒烯或羧基化单壁碳纳米管联合使用降低Fas蛋白表达的差异不显著。动物水平实验结果表明:黄芪甲苷联合氧化石墨烯能够显著下调小鼠脾脏T淋巴细胞FasL的表达,对小鼠胃黏膜组织具有更好的保护作用。综上所述,黑冰片能够通过影响Fas/FasL凋亡通路治疗小鼠胃溃疡,其三种碳纳米颗粒成分中的氧化石墨烯对此通路的影响效果最为显著。与黄芪甲苷或氧化石墨烯的单一作用相比,黄芪甲苷联合氧化石墨烯能够更好地治疗小鼠胃溃疡。