Toll样受体4在人胆管上皮细胞上皮—间叶样表型转化中作用的实验研究

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目的探讨Toll样受体4(TLR4),上皮-间叶样表型转化相关标志物MMP-2、CK19,核转录因子Snail在肝胆管结石患者胆管上皮细胞中的表达及意义。材料与方法1、临床标本:选取2010年9月至2012年10月在遵义医学院附属医院因肝内外胆管结石行部分肝切除之标本25例作为实验组。选取同期因肝血管瘤行部分肝脏切除术之标本10例作为正常对照组。所有标本均为术中获取的新鲜标本。临床标本的应用得到遵义医学院伦理委员会批准,并获得病人知情同意。2、检测方法:应用免疫组化方法检测TLR4、上皮标志物CK19、间叶标志物MMP-2、核转录因子Snail在实验组及对照组胆管上皮细胞中的表达。结果1、TLR4在正常对照组胆管上皮细胞中仅少量表达;而在肝胆管结石组胆管上皮细胞中表达较强,其表达量显著高于正常对照组(P<0.05)。2、CK19在正常对照组肝内胆管上皮细胞中表达较强,而在肝胆管结石标本的胆管上皮细胞中表达显著下降,两组间CK19表达量的比较有显著差异(P<0.05); MMP-2、Snail在肝胆管结石标本胆管上皮细胞中的表达显著强于正常肝胆管上皮组织中的表达(P<0.05)。3、相关性分析显示,胆管上皮细胞中TLR4的表达量与CK19呈负相关(P=0.00,r=-0.96),而与MMP-2、Snail的表达呈正相关(P=0.00,r=0.965,0.975)。结论1、胆管结石患者胆管上皮细胞中上皮标志物表达下调或缺失,间叶标志物升高,且促上皮-间叶样表型转化(EMT)的核转录因子表达也显著升高,表明者胆管上皮细胞可能发生了EMT。2、TLR4在胆管结石患者胆管上皮细胞中表达明显增强,且与上皮标志物表达呈负相关,而与间叶标志物及促EMT的核转录因子的表达呈正相关,提示TLR4可能在胆管上皮细胞EMT的发生中起着重要作用。
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