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癌症是威胁人类健康的头号杀手,乳腺癌是女性常患癌症中发病率和死亡率最高的一种,严重威胁女性的生命健康。九香虫在临床上常与其他药物配伍用于治疗癌症,水煎液为常用的用药方式。本研究探究九香虫水煎液在体内外对乳腺癌生长的影响,并初步明确九香虫水煎液在体内作用的安全性,为九香虫临床研究和应用提供实验基础,为传统中药治疗乳腺癌提供参考。主要实验方法与结果如下:1.采用CCK-8比色法检测0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 g/m L九香虫水煎液对人乳腺癌细胞MDA-MB-453、HCC1937和小鼠乳腺癌细胞4T1增殖的影响。结果显示,九香虫水煎液能显著抑制这三种乳腺癌细胞增殖（P<0.001）,且呈剂量依赖性。九香虫水煎液作用于MDA-MB-453、HCC1937和4T1细胞24 h后半抑制浓度(IC50)分别为0.036、0.024和0.101 g/m L。2.采用细胞划痕实验探究九香虫水煎液对MDA-MB-453和HCC1937迁移能力的影响。结果表明,0.02、0.04和0.06 g/m L九香虫水煎液作用于MDA-MB-453细胞24 h和48 h后迁移率均显著低于对照组（P<0.01）。0.02 g/m L和0.04g/m L九香虫水煎液分别作用于HCC1937细胞8 h和24 h后,HCC1937细胞迁移率均显著低于对照组（P<0.05）,可见,九香虫水煎液可抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-453、HCC1937迁移,且迁移率呈剂量与时间依赖性。3.Annexin V-FITC/PI染色经流式细胞仪检测九香虫水煎液对乳腺癌细胞凋亡的影响。0.02、0.06、0.10 g/m L九香虫水煎液作用于MDA-MB-453和HCC1937细胞24 h后,细胞早期凋亡率均显著高于对照组早期凋亡率（P<0.0001）;0.10g/m L水煎液作用后细胞晚期凋亡率显著大于对照组晚期凋亡率（P<0.0001）。表明九香虫水煎液可诱导乳腺癌细胞凋亡,以诱导早期凋亡为主,且呈剂量依赖性。4.通过流式细胞术检测九香虫水煎液对乳腺癌细胞周期的影响,结果显示,九香虫水煎液处理MDA-MB-453细胞24 h后,G1期细胞比例较对照组显著增多（P<0.001）,S期细胞比例显著减少（P<0.001）,G2期无显著差异。九香虫水煎液处理HCC1937细胞24 h后,与对照组相比,处于G1期和S期细胞比例显著减少（P<0.05）,而处于G2期的细胞比例显著增加（P<0.001）。表明MDA-MB-453细胞周期阻滞于G1期,而HCC1937细胞周期阻滞于G2期。5.利用qRT-PCR检测0.06 g/m L九香虫水煎液作用于乳腺癌MDA-MB-453、HCC1937细胞24 h后凋亡相关基因（caspase-3、caspase-8、Bax、Bcl-2）、迁移相关基因（MMP-2、MMP-9）和周期相关基因（CDK-1、CDK-2、cyclin A1、cyclin B1）m RNA的表达。九香虫水煎液作用后两种细胞中促凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、Bax表达显著上调（P<0.001）,抑凋亡基因Bcl-2表达下调（P<0.0001）,表明九香虫水煎液可能通过上调caspase-3、caspase-8和Bax,下调Bcl-2诱导乳腺癌细胞凋亡;两种细胞中MMP-2和MMP-9表达都显著下调（P<0.0001）,表明九香虫水煎液可能是通过下调MMP-2和MMP-9表达抑制细胞迁移;两种细胞中周期相关基因CDK-1表达显著下调（P<0.05）,CDK-2下调,但无统计学差异（P>0.05）,cyclin A1和cyclin B1表达均显著下调（P<0.05）,表明九香虫水煎液可能是通过下调CDK-1、cyclin A1和cyclin B1表达而阻滞细胞周期。6.通过构建Balb/c小鼠乳腺癌移植瘤动物模型,探究九香虫水煎液在小鼠体内对乳腺癌细胞增殖作用。比较解剖后乳腺癌小鼠瘤体体积和重量,灌胃九香虫水煎液可减小小鼠乳腺癌肿瘤体积和重量,但是与生理盐水组比较无统计学差异。瘤体组织H&E染色结果显示,九香虫水煎液作用后的小鼠瘤体细胞密度较低,瘤体组织中毛细血管也较少。在各组肝、脾、肺、肾、胃H&E染色切片中均未发现肿瘤细胞转移。7.通过腹腔注射九香虫水煎液,探究其对乳腺癌小鼠移植瘤体内生长的影响。通过腹腔注射低、中、高剂量九香虫水煎液后对乳腺癌小鼠移植瘤生长无抑制作用。通过计算小鼠器官的脏器系数和H&E染色,与生理盐水组小鼠相比,低、中剂量组小鼠肺脏器系数显著偏高（P<0.05）,高剂量组小鼠肝、脾脏器系数显著偏大（P<0.001）,肝细胞间及中央静脉周围可见少量中性粒细胞及淋巴细胞浸润。低、中、高剂量九香虫水煎液组小鼠肺组织肺泡间隔增宽,肺泡腔及肺泡间隔内见大量中性粒细胞及单核细胞浸润,存在肺部充血和炎症的特征,其余器官无明显病理特征。8.采用最大剂量耐受量法观察九香虫水煎液对昆明小鼠的急性毒性。与对照组相比,小鼠无中毒症状和异常行为活动反应,小鼠体重、进食量和进水量无明显异常。通过测量小鼠的血生化指标,结果显示,雄鼠葡萄糖（GLU）偏低,其余指标正常,雌鼠总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）、尿酸（UA）偏低,总胆红素（T-Bil）、直接胆红素（D-Bil）偏高;给药组雄鼠和雌鼠各脏器系数分别与对照组雄鼠和雌鼠相比无显著差异。分析肝、脾、肾、肺、胃、卵巢、睾丸组织H&E染色切片,雌鼠肝有淋巴细胞浸润,其余器官未见异常。20 g/kg九香虫水煎液无致死作用,MTD（最大耐受剂量）>20 g/kg。综上,九香虫水煎液在体外可抑制人乳腺癌细胞和小鼠乳腺癌细胞增殖,并且可抑制人乳腺癌细胞迁移、调控细胞周期和诱导细胞凋亡。九香虫水煎液经口的最大耐受剂量大于20 g/kg。