弯曲菌多重PCR检测方法的建立及其初步应用

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弯曲菌(Campylobacter spp)是一种重要的食源性病原菌,可引起人类急性肠炎、格林巴利综合症、反应性关节炎、Reiter’s综合症等多种疾病。人类常因摄入被弯曲菌污染的肉类、水、牛奶等而感染。目前许多发达国家已建立起完善的监测和控制体系,并对该菌进行了较为深入的研究,而我国在这方面的研究相对滞后,调查报道较少。本研究的目的是:⑴优选适合于弯曲菌大规模检测和流行病学调查的常规培养方法;⑵建立空肠弯曲菌和结肠弯曲菌多重PCR检测新方法;⑶对扬州地区三个农贸市场和某生猪屠宰加工厂空肠弯曲菌和结肠弯曲菌污染情况进行初步调查研究。一弯曲菌常规培养方法的优选用烛缸法、微需氧罐法和二氧化碳培养箱法产生的微需氧环境培养弯曲菌,比较其对弯曲菌生物学特性的影响,结果表明微需氧罐法和二氧化碳培养箱法产生的气体条件明显优于烛缸法,经综合评价选用二氧化碳培养箱法作为弯曲菌选择性培养的方法。用三种不同的选择性培养基:国产CCDA、进口CCDA和Campy-BAP培养弯曲菌,比较其生物学特性上的差异,结果表明Campy-BAP琼脂和进口CCDA明显优于国产CCDA,经综合比较选用进口CCDA作为弯曲菌选择性培养的培养基。用7种方法保存弯曲菌,分别在冻存后第14、30、60、90、180天复苏,比
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