月见草叶总黄酮提取、纯化及抗氧化活性研究

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本实验以新疆伊犁州霍城县月见草基地产的月见草叶为原料,以总黄酮为研究对象,对月见草叶总黄酮提取、纯化及抗氧化活性进行了研究,研究结果为月见草叶的综合利用与深入开发提供了一定的理论基础。本论文研究的主要内容与结果如下:1、采用乙醇加热回流提取法对月见草叶总黄酮进行提取,通过L9(34)正交试验确定了乙醇溶液提取总黄酮的最佳工艺参数:乙醇浓度80%、料液比1:30(g/ml)、提取时间2h;通过方差分析表明,影响月见草叶总黄酮提取的主要因素依次为乙醇浓度(%)、提取时间(h)、料液比(g/ml)。在最优条件下对月见草叶总黄酮进行提取,月见草叶总黄酮含量为5.15%。以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH为显色剂,芦丁为标准品,采用紫外可见分光光度法建立了月见草叶总黄酮含量测定方法,并对其进行方法学考察,结果得出该方法精密度、稳定性、重现性良好,加样回收率高。2、在大孔吸附树脂纯化月见草叶总黄酮研究实验中,考察了影响大孔吸附树脂静态和动态吸附与洗脱主要因素,优化了月见草叶总黄酮纯化条件。三种大孔吸附树脂静态吸附和解吸的实验结果表明,AB-8吸附和解吸效果较为理想,其吸附和解吸优化条件为:吸附质溶剂为水,提取液pH4.75,洗脱剂为70%乙醇,上样液浓度3mg/ml,上样速度2ml/min,上样量29ml,洗脱速度2ml/min,洗脱量100ml。在优化条件下对月见草叶总黄酮进行纯化,月见草叶总黄酮含量达49.13%。采用显色反应和紫外光谱对纯化物进行定性鉴别,实验结果进一步表明月见草叶中含有黄酮类化合物。3、在月见草叶总黄酮体外抗氧化活性研究实验中,通过比色法测定月见草叶总黄酮对DPPH·自由基、·OH自由基、O2-·自由基的清除作用;分光光度法测定月见草叶总黄酮对过氧化氢诱导小鼠红细胞溶血的影响;硫代巴比妥酸比色法测定月见草叶总黄酮对小鼠肝脏脂质过氧化的影响。结果表明,月见草叶总黄酮对DPPH·自由基、·OH自由基、O2-·自由基均有一定的清除作用,并且具有一定的还原能力,可以减少红细胞溶血、抑制羟自由基引起的脂质过氧化。
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