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研究背景脑性瘫痪(cerebral palsy)简称脑瘫(CP),是小儿先天性或围生期所发生的脑功能障碍性综合征,以中枢性运动障碍及姿势异常为主,常伴发智力低下、癫痫、语言障碍、视听异常等多重残障。是常见的儿童致残性疾病,严重危害着小儿身心健康,也给家庭和社会造成了巨大的负担。目前西医学对脑瘫的治疗未有重大突破,而中医针刺治疗脑瘫是一大特色,并取得一定疗效,大量的实验研究证实了针刺的有效性,而针刺结合温和灸的实验研究目前罕见。研究目的通过针针刺、温和灸干预CP幼鼠模型,观察幼鼠从体重变化,测试其学习记忆能力和幼鼠脑组织中氧化-抗氧化因子的影响等方面探讨针灸改善CP模型幼鼠运动障碍以及学习记忆障碍的可能机制。为针灸在临床上改善脑瘫儿童在学习记忆能力方面的缺陷提供新方法,填补针刺结合温和灸治疗脑瘫儿童在实验研究中的空白。实验方法将实验动物随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组、艾灸组和针刺组+艾灸组。通过结扎左颈总动脉和低氧处理的方法造模,制备幼鼠脑性瘫痪模型,针刺组参照《实验针灸学》,取小鼠“内关”、“涌泉”速刺微出血,不留针,“曲池”、“足三里”穴针1分深左右,头部穴位百会、颞Ⅰ针平刺,留针10min。艾灸组用无烟艾温和灸头顶区穴位“百会”、“颞Ⅰ针”10分钟。针刺+艾灸组为二者结合,正常组、假手术组、模型组不予以任何治疗。经治疗干预疗后称取每只幼鼠重量、测定实验幼鼠行为学、处死断头取脑,切取冠状脑片测定SOD、GSH-Px和MDA、NO含量变化。结果体重变化:造模当天,各组幼鼠体重均无明显差异。18天后各处理组间体重增加均数不等或不全等,具有显著性差异(P<0.01);正常组,假手术组,艾灸组,针刺+艾灸组这四组之间体重增加趋势没统计学差异,模型组与单纯针刺组之间也无统计学差异。而前四组与后两组相比,P<0.01,体重增加的趋势有统计学意义。肌力(悬吊试验):假手术组>正常组>针刺+灸组>艾灸组>模型组>单纯针刺组;不同处理方法对CP幼鼠肌力(悬吊试验)的差异有统计意义(P<0.01)。学习和记忆能力(Y迷宫实验):正常组>假手术组>针刺+灸组>艾灸组>单纯针刺组>模型组。正确次数不完全相等,差异有统计意义(P<0.01)。脑组织病理学(病理形态和神经细胞数目):普通光镜下随机观察每张切片5个视野内脑缺血缺氧后病理变化情况。各组实验大鼠脑组织病理形态学改变:脑组织常规石蜡切片,HE染色后,神经细胞胞浆呈淡紫色,核呈蓝黑色。正常对照组及假手术组皮层脑细胞结构正常,细胞核圆而大,核仁清晰。胞浆丰富,间质无水肿表现。模型组可见部分区神经元浓缩,核周质浓缩着色较深,神经元褶皱变形。部分神经元核固缩、深染,细胞间隙扩大、水肿。针刺组、艾灸组及针刺结合艾灸治疗组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少,细胞间质水肿不明显。正常神经细胞数目:与模型组比较,治疗后针刺组、艾灸组、针灸结合组的正常神经细胞数目显著高于模型组(P<0.05),具有统计学意义,而三者疗效无明显差异;与正常组比较,假手术组正常神经细胞数目虽低于正常组,但不具统计学意义(P>0.05)。脑组织中氧化-抗氧化因子含量:与模型组比较,治疗后针刺组、艾灸组、针灸结合组的SOD、GSH-Px含量均显著高于模型组(P<0.05),具有统计学意义,而正常对照组对比模型组指标含量虽高,但不具统计学意义(P<0.01);与正常组比较,假手术组SOD、GSH-Px含量虽高于模型组,但不具统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,治疗后针刺组、艾灸组、针灸结合组的MDA、NO含量均显著低于模型组(P<0.05),具有统计学意义,而正常对照组对比模型组指标含量虽低,但不具统计学意义(P<0.01);与正常组比较,假手术组MDA、NO含量虽低于模型组,但不具统计学意义(P>0.05)。结论通过本实验发现针刺和艾灸相结合在提高幼鼠的体重和学习记忆能力方面均比单纯艾灸的效果更好,说明针刺和艾灸同用具有叠加效应,提示治疗脑瘫患儿时,若针与灸结合使用能提高临床疗效。本研究对针灸改善CP模型幼鼠的学习记忆能力的机制进行了探讨,发现单纯针刺、单纯艾灸、针与灸结合均可增加幼鼠脑组织中的正常神经细胞数量、提高SOD和GSH-Px的含量、降低MDA和NO的含量。