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第一部分神经纤维瘤病-1型的临床诊断以及分子遗传学研究目的:神经纤维瘤病-1型（Neurofibromatosis type 1,NF1）是临床上最常见的以神经系统病变为主的常染色体显性单基因遗传病之一,据国内外文献报道,其发病率约为1/3000。神经纤维瘤病-1型临床上主要表现为神经纤维瘤、牛奶咖啡斑、面部胸背部及褶皱处皮肤广泛存在的雀斑、Lisch结节、视神经胶质瘤以及骨骼损害等。四肢骨骼损害中尤为常见的是胫骨弯曲,甚至形成胫骨假关节,从而严重影响患者的行走功能、生活质量。当前的研究显示,位于染色体17q11.2上的抑癌基因NF1基因的失活突变是该病发生的最主要的原因。即使NF1有较高的发病率,目前尚未发现相关热点突变。因此,针对神经纤维瘤病-1型患者进行NF1基因的突变检测,对于辅助诊断以及为治疗提供循证依据都有重要意义。本研究对临床确诊为NF1的患者及其一级亲属进行NF1基因的Sanger测序,根据检测结果对NF1发病的分子遗传学机制进行分析及探讨。方法:研究对象为来自10个不同中国家系中的10个临床表现典型的确诊先证者及其家属,并招募200名健康志愿者。我们收集患者家族史、疾病发展史、体格检查资料、实验室及影像学检查结果作为基础资料。在签署知情同意书后,采集所有先证者及其家属的外周血DNA,针对NF1基因经聚合酶链式反应（PCR）后直接基因测序。对于基因突变位点的保守性使用UniProt作为参考,对于确诊的NF1患者的基因检测结果采用Mutation Taster和PolyPhen-2进行致病性预测,对基因型与表现型关系进行分析。结果:我们在10个家系中均检测到NF1基因,其中包括5个新发突变:18号外显子上的错义突变c.2125T>C从而导致p.Cys709Arg;34号外显子上的移码突变c.4436dupT从而导致p.Leu1459Profs*2;4号外显子上的移码突变c.4436dupT从而导致p.Lys99Argfs*4;19号外显子上的移码突变c.2283delA从而导致p.Leu762Cysfs*2;34号外显子上的移码突变c.45624563dupAT从而导致p.Leu1522Ilefs*53。在患者的健康家属及200名健康志愿者中并未检测到NF1基因的突变。先证者的患病家属与先证者的检测结果都是一致的。结论:本研究中的先证者均检测到NF1基因的突变,佐证了NF1基因突变与这些患者的临床表现密切相关。检测到的5个新的突变位点也进一步拓展了NF1基因的基因突变谱,为进一步了解神经纤维瘤病-1型患者的病因提供了线索,也为该病的产前检查及遗传咨询提供了循证依据。第二部分 X-连锁低磷性佝偻病的临床诊断以及分子遗传学研究目的:X-连锁低磷性佝偻病（X-linked hypophosphatemia,XLH）是最常见的遗传性低磷性佝偻病,它最主要的特点是血清磷酸盐浓度的降低和维生素D活化的障碍致使骨矿化功能受损。XLH是一种X-连锁显性遗传的单基因遗传病,国内外文献报道的发病率约为1:20000。其临床表现多变,轻度可仅表现为实验室检查血液磷酸盐水平下降;重度可表现为身材矮小、骨骼畸形、骨及关节疼痛、病理性骨折、方颅或狭颅、鸡胸、肋骨串珠、肌腱以及韧带的矿化、牙齿病变、听力障碍、活动乏力等。目前,对于XLH的发病机制尚未完全明确,但大多数病例主要是与位于X染色体上Xp22.1的PHEX基因突变有关。本研究对临床确诊为XLH的患者及其一级亲属进行PHEX基因的Sanger测序,根据检测结果对XLH发病的分子遗传学机制进行分析及探讨,有利于该疾病的产前诊断以及为治疗提供循证学依据。方法:研究对象为来自6个不同中国家系中的6个临床表现典型的确诊先证者及其家属,并招募200名健康志愿者。我们收集患者家族史、疾病发展史、体格检查资料、实验室及影像学检查结果作为基础资料。在签署知情同意书后,采集所有先证者及其家属的外周血DNA,针对PHEX基因经聚合酶链式反应（PCR）后直接基因测序。对于基因突变位点的保守性使用UniProt作为参考,对于确诊的XLH患者的基因检测结果采用Mutation Taster和PolyPhen-2进行致病性预测,对基因型与表现型关系进行分析。结果:我们在6个家系中均检测到PHEX基因,其中包括4个新发突变:10号内含子上的剪切方式的改变（c.1174-3C>G）引起蛋白质氨基酸序列改变;20号外显子上的错义突变p.Pro671Thr（c.2011C>A）;7号外显子上的错义突变p.Met271Arg（c.812T>G）;4号外显子上的缺失突变p.Ala135ProfsX9（c.402delA）。在患者的健康家属及200名健康志愿者中并未检测到PHEX基因的突变。先证者的患病家属与先证者的检测结果都是一致的。结论:本研究检测到6个先证者的PHEX基因突变,其中有4例是新的突变,佐证了 XLH基因突变与这些患者的临床表现密切相关。检测到的4个新的突变位点也进一步拓展了PHEX基因的突变谱,为进一步了解XLH的病因提供了线索,也为该疾病的产前检查及遗传咨询提供了循证依据。