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研究目的银屑病是一种常见慢性炎症性皮肤病,其发病机制与皮肤局部免疫失调密切相关。以往研究发现Ⅰ型干扰素IFNα/β在银屑病的发病机制中起重要作用。卡帕干扰素(interferon kappa,IFN-κ)是近年来新发现的表皮角质形成细胞特异表达的一种Ⅰ型干扰素,本课题将研究IFN-κ是否在银屑病皮肤中有异常表达,若有表达异常,则进一步运用细胞学实验和小鼠银屑病动物模型来研究IFN-κ在银屑病发病机制中的作用。研究方法本课题首先用免疫组织化学的方法检测IFN-κ在寻常型银屑病皮损活检组织、湿疹、硬化苔藓、尖锐湿疣、扁平苔藓和健康正常皮肤活检组织中的表达,用Image Pro-Plus分析软件对染色阳性信号进行半定量,比较表达差异。然后使用体外原代角质形成细胞培养体系研究IFN-κ对角质形成细胞分化的影响,以及调节IFN-κ上调的因素。最后采用咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)软膏诱导建立银屑病小鼠模型,通过联合使用IFN-κ细胞因子或IFN-κ抗体,研究IFN-κ是否加重或减轻银屑病症状。研究结果1、与正常皮肤表皮组织相比,IFN-κ细胞因子在银屑病皮损表皮中表达显著增加,而IFN-κ在湿疹和硬化苔藓皮损中则显著下调。在尖锐湿疣和扁平苔藓中无明显改变。2、IFN-κ对角质形成细胞分化无明显影响;IFN-κ的表达在未分化和分化的角质形成细胞中能够被IFN-α、IFN-β、IFN-γ和TNF-α显著诱导。IFN-κ的表达在未分化和分化的角质形成细胞中能够被模式识别受体激动剂的拟合物PolyI:C和PolydA:dT诱导。3、用IMQ软膏成功诱导建立银屑病小鼠模型,小鼠出现明显的红斑、鳞屑及表皮增生等银屑病特征性表型,IFN-κ在小鼠银屑病皮损中显著增加。皮下注射IFN-κ细胞因子不能诱导银屑病样病变,但能显著诱导TNF-α和IL-17A;但对IMQ诱导银屑病的表型无明显增强效应。皮下注射IFN-κ抗体对小鼠银屑病的表型也无明显阻断作用。研究结论IFN-κ蛋白表达在银屑病皮损的表皮中特异性增加,表明其可能作临床鉴别诊断标志。细胞学实验证明IFN-κ对角质形成细胞的分化无调节作用,表明其可能不直接参与银屑病病变中表皮分化紊乱机制。IFN-κ在角质形成细胞中能被多种银屑病相关细胞因子以及细胞内RNA识别拟合物诱导,表明其在银屑病病变中的表达上调可能与这些因素有关。皮下注射IFN-κ细胞因子或抗体对IMQ诱导银屑病无明显影响,表明IFN-κ可能不参与银屑病的发生发展的分子机制。