论文部分内容阅读
二甲戊乐灵(Pendimethalin)是广谱高效的二硝基苯胺类选择性除草剂,在环境中的降解主要是生物降解和光降解。国内外有关于二甲戊乐灵降解微生物的报道,但降解效率都有待提高。本研究从长期施药的土壤中筛选得到二甲戊乐灵高效降解真菌菌株,并研究了该菌株的降解特性及其应用,为微生物制剂的制备及应用提供了实验基础和理论依据。本研究首先确定了以石油醚作为萃取剂,以分液漏斗提取真菌培养液中二甲戊乐灵的提取方法,并进一步验证了二甲戊乐灵液相色谱的检测条件。然后采用富集培养的方法,从长期施药的土壤中筛选出二甲戊乐灵高效降解菌株,并通过菌落特征和构建进化树鉴定菌株。接着研究环境因素对高效降解菌株的降解率和生长量的影响,同时研究了高效降解真菌在土壤中的作用。研究结果表明,以石油醚作为萃取剂,提取菌培养液中二甲戊乐灵,采用配有紫外可见检测器(SPD-M20A)的高效液相色谱仪(LC-20AT,Shimadzu)检测,C18色谱柱:4.6×150mm,5μm(ECOSIL ODS,Japan);流动相为甲醇-水,体积比为85:15;流量为1ml/min,柱温,30℃;检测波长为238nm。筛选得到降解二甲戊乐灵的6个菌株,其中Qsun-6对二甲戊灵的降解率高达75.21%,经DNA鉴为塔宾曲霉(Aspergillustubingensis)。菌株Qsun-6在外加碳源为1%左右,二甲戊乐灵浓度低于200mg·L-1、pH为6、温度为30℃的培养条件下,具有较高的生长量和降解率。二甲戊乐灵处理后的土壤中对萝卜苗毒害严重,但是经高效降解菌株Qsun-6处理的药害土壤对萝卜苗的影响明显降低,发芽抑制率为10%,降低了45%,出苗后生长21d,生长抑制率仅为4.57%,降低了33.64%。Qsun-3经DNA鉴定为米曲霉(Aspergillus oryzae),虽然对二甲戊乐灵耐受性较强,但其降解率及对施药土壤的处理效果都低于Qsun-6。