人mda-7/IL-24的表达和生物活性研究

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恶性肿瘤的治疗是医学上多年来面临的挑战性课题。 研究表明:肿瘤生长的关键因素之一是血管形成,实体瘤可表达血管形成介质,导致肿瘤产生新血管并实现转移。抑制肿瘤生长和血管形成以及阻止肿瘤转移是肿瘤治疗的重要课题,基因疗法为恶性实体瘤的治疗提供了这种可能性。理想的功能基因表达产物应能诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长和肿瘤血管形成,对正常组织细胞无明显毒性作用。mda-7/IL-24基因异位表达具有这些功能特点,经过对该基因的广泛研究,目前已用于抗肿瘤治疗的Ⅰ期临床试验。 mda-7/IL-24的功能机制尚不明确,它可通过多种途径发挥作用,但不清楚它对食管癌和小细胞肺癌是否具有同样的作用,为此我们对其进行了克隆,通过多种途径进行体外表达,并探讨其对食管癌细胞Eca-109、肺癌H460(大细胞癌)和小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。我们的工作获得如下结果: 1.通过RT-PCR从PHA刺激培养的人外周血淋巴细胞中克隆得到mda-7/IL-24编码cDNA,测序正确;诱导表达了带His-tag的MDA-7/IL-24融合蛋白,用包涵体形式的融合蛋白作为免疫原制备多克隆抗体,可用于Western-blot检测在大肠杆菌、肿瘤和正常细胞中过表达的MDA-7/IL-24蛋白分子。
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