目的:急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是由各种直接或间接损伤因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,表现为弥漫性肺间质及肺泡水肿,导致急性低氧性呼吸功能不全,严重者可致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。ALI的危险因素很多,如肺炎、机械损伤、输血相关、脓毒症等,其中最普遍危险因素为肺炎或脓毒症。患者暴露在多种危险因素下会导致内皮细胞过度激活和功能障碍,血管通透性升高,屏障功能损害。三方基序（TRIM）蛋白属于RING型E3泛素连接酶亚家族成员,它包含80多个不同的蛋白成员,在调节细胞生长、分化、发育、凋亡、炎症和免疫中发挥重要作用,与人类诸多疾病紧密相关。TRIM2属于TRIM家族成员,已有研究证明其在许多疾病中高表达,如特发性肺纤维化、肺腺癌、胰腺癌等,尤其是在特发性肺纤维化的肺组织中表达显著升高。ALI可能成为肺纤维化的早期病因,但TRIM2在ALI中的作用尚未见报道,因此,研究TRIM2在ALI发生发展中的作用及机制,对ALI的诊断、治疗和预后评估具有重要的临床意义。方法:1.检测TRIM2在脓毒症ALI小鼠肺组织中的表达:利用H＆E染色、免疫组织化学染色以及Western Blot等方法验证TRIM2在脓毒症ALI小鼠肺组织及细胞表达及分布情况;用体外培养人脐静脉内皮细胞融合细胞（EA.hy926）构建LPS、IL-1β和TNF-α刺激诱导内皮细胞炎症反应模型,检测此三种炎症刺激下TRIM2在基因与蛋白水平的表达差异。2.检测TRIM2对炎症损伤内皮细胞功能的影响及机制:慢病毒感染EA.hy926细胞构建稳转的TRIM2过表达或敲低的内皮细胞;q RT-PCR检测TNF-α诱导炎症反应下过表达或敲低TRIM2的内皮细胞中促炎细胞因子与粘附因子m RNA表达;THP-1粘附实验观察内皮细胞粘附能力变化情况;细胞划痕实验测试内皮细胞迁移能力;Western Blot检测NF-κB信号通路激活的情况;GST Pull-down和免疫共沉淀验证TRIM2与NF-κB信号通路负调控因子A20蛋白的相互作用;Western Blot检测TRIM2过表达对A20降解速率的影响。结果:1.TRIM2蛋白在LPS和CLP诱导的脓毒症ALI小鼠肺组织中高表达,且在肺组织的血管部位表达明显增高;LPS、IL-1β和TNF-α可在转录和蛋白水平明显促进内皮细胞的TRIM2表达。2.过表达内皮细胞TRIM2可明显增加TNF-α诱导的多种黏附分子和促炎细胞因子的m RNA表达,增强内皮细胞粘附作用,并促进内皮细胞迁移。此外过表达TRIM2蛋白可促进TNF-α诱导的IKKα/β、IκBα和p65磷酸化,激活NF-κB信号通路。TRIM2表达量与A20表达量负相关。在HEK-293T细胞中,转染TRIM2质粒与A20质粒,GST Pull-down和免疫共沉淀结果证实TRIM2与NF-κB信号通路负调控因子A20蛋白存在直接相互作用,免疫荧光共聚焦实验显示它们在内皮细胞的细胞质中存在共定位。结论:1.TRIM2在脓毒症ALI小鼠肺组织中的表达比正常肺组织高,且在血管内皮细胞中升高显著。2.过表达TRIM2基因加重TNF-α诱导血管内皮细胞炎症损伤的机制可能与TRIM2加快A20蛋白降解,继而激活NF-κB信号通路,加重血管内皮细胞炎症有关。