【摘 要】
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目的:脂多糖（LPS）能损坏膀胱黏膜屏障。本文通过在脂多糖（LPS）诱导的膀胱炎模型上明确透明质酸钠（Sodium Hyaluronate,SH）是否可以修复膀胱黏膜屏障改善膀胱炎症,并初步探讨其中的作用机制,为临床上膀胱炎治疗提供可能的解决方案。研究方法:1.将膀胱上皮细胞随机分为空白对照组、LPS模型组、LPS+透明质酸钠,采用划痕实验检测膀胱上皮细胞迁移能力、采用CCK-8实验检测细胞活性;
【基金项目】
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深圳市三名工程（No.SZSM201612013）； 深圳市医学重点学科（No.SZXK035）；
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目的:脂多糖（LPS）能损坏膀胱黏膜屏障。本文通过在脂多糖（LPS）诱导的膀胱炎模型上明确透明质酸钠（Sodium Hyaluronate,SH）是否可以修复膀胱黏膜屏障改善膀胱炎症,并初步探讨其中的作用机制,为临床上膀胱炎治疗提供可能的解决方案。研究方法:1.将膀胱上皮细胞随机分为空白对照组、LPS模型组、LPS+透明质酸钠,采用划痕实验检测膀胱上皮细胞迁移能力、采用CCK-8实验检测细胞活性;2.采用LY294002抑制PI3K/Akt通路,将膀胱上皮细胞分为LPS组、LPS+通路抑制剂组、LPS+透明质酸钠组、LPS+透明质酸钠+通路抑制剂组,培养12h、24h后,通过Elisa检测细胞培养液上清中白介素-6、白介素-8浓度;Western Blotting测定12小时下凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达。以上结果数据最终通过Image J、Graphpad Prism进行分析。结果:1.6h中LPS+SH组较空白对照组具有统计学差异（P＜0.05）,12h中LPS组、LPS+SH组较空白对照组均表现出较强的细胞迁移能力;以上三组均可观察到细胞伪足生长状态,其中12h下LPS组的迁移能力较空白对照组高,并且LPS及LPS+透明质酸钠组较对照组还可观察到少量细胞死亡。2.CCK-8中LPS+SH组细胞活性最高,LPS组与对照组（P＜0.05）、LPS+SH组与对照组（P＜0.01）均有统计学差异3.LPS+SH组较LPS组、LPS+SH+通路抑制剂组较LPS+通路抑制剂组的Bcl-2/Bax比值均具有统计学差异（P＜0.001）;LPS+通路抑制剂组比值较LPS组高,两者差异没有统计学差异（P＞0.05）。4.在12h内IL-6浓度:LPS+通路抑制剂+SH组与其余三组均具有统计学差异（P＜0.001）,LPS+通路抑制剂组与LPS组（P=0.002）、LPS+HA组（P＜0.001）均具有统计学差异,LPS组与LPS+SH组无统计学差异（P=0.233）;IL-8浓度各组间均不存在统计学差异。在24h内IL-6浓度:LPS+通路抑制剂组与LPS组、LPS+SH组、LPS+通路抑制剂+SH组均具有统计学差异（P＜0.001）,LPS+通路抑制剂组+SH与LPS+通路抑制剂组（P＜0.001）、LPS+SH组（P=0.15）也均具有统计学差异,LPS+SH组与LPS组无统计学差异（P=0.541）。IL-8浓度:LPS+SH与其余三组均具有统计学差异（P＜0.001）,LPS与LPS+SH组无统计学差异（P=0.09）。结论:1.透明质酸钠均可促进细胞增殖,而LPS引起的细胞增殖可能与细胞坏死释放的炎症因子刺激细胞有关2.透明质酸钠可促进凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值升高,表明透明质酸钠可通过PI3k/Akt通路提高细胞抗凋亡能力。
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