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目的:在大鼠“足三里”穴埋入羊肠线、PGLA线,观察穴区局部肥大细胞(mast cell,MC)计数及脱颗粒率、P物质(substance-P,SP)及组胺(histamine,HA)表达水平随时间变化的规律,初步探讨穴位埋线刺激效应及其时效性背后的作用机制,为深入研究穴位埋线效应源头启动机制奠定基础。方法:160只SPF级雄性SD大鼠,随机分为空白组(10只)、埋线针空刺大组(简称空刺组)50只、羊肠线埋线大组(简称羊肠线组)50只和PGLA线埋线大组(简称PGLA线组)50只,3个大组分别再随机分为干预后8h、3d、7d、14d、21d5个时间点组,每个组10只。空白组作未干预空白对照。三个大组统一在大鼠左侧“足三里”穴实施相应线体埋入或空刺(仅不埋入线体,其他操作同埋线组处理)处理1次,空白组只抓取固定,不作其他干预。空白组在空刺或埋线前一天时统一采集标本,余下各时间点组分别在8h、3d、7d、14d、21d,采集大鼠“足三里”穴区皮肤及皮下结缔组织(1cm × 1cm ×1cm),分别用甲苯胺蓝染色法、免疫组织化学技术检测各时间点组MC计数及脱颗粒率、SP及HA的表达水平。结果:1.一般情况:实验过程及结束后,各组大鼠“足三里”穴区埋线局部均无红肿、化脓等不良反应。2.各组MC计数:(1)与空白组比较,羊肠线埋入后21d组MC计数显著增多(P<0.05),羊肠线埋入后其他时间点组、空刺及PGLA线各时间点组MC计数均无统计学意义(P>0.05)。(2)空刺、羊肠线、PGLA线组内各时间点比较,羊肠线3d组较8h组增多(P<0.01),7d组较3d组降低(P<0.05),羊肠线其他时间点组、空刺及PGLA线各时间点组MC计数,均无统计学意义(P>0.05)。(3)羊肠线、PGLA线组间同一时间点比较,PGLA线8h组MC计数较羊肠线8h组增多(P<0.05),PGLA线21d组MC计数较羊肠线21d组降低(P<0.05)。3.各组MC脱颗粒率:(1)与空白组比较,空刺后8h、3d组MC脱颗粒率明显升高(P<0.01,P<0.05),空刺后7d、14d、21d组差异不具显著性(P>0.05);羊肠线8h、3d、7d组MC脱颗粒率显著升高(P<0.001,P<0.01,P<0.05),14d、21d组差异不具显著性(P>0.05),大致变化趋势为:埋线后8h开始升高,3d时达峰,后逐渐下降,至14d时降到埋线前水平,其间8h、3d、7d组之间比较,差异不具显著性(P>0.05);PGLA线8h、3d、7d、14d组MC脱颗粒率均有不同程度升高(P<0.001,P<0.01,P<0.05),21d组差异不具显著性(P>0.05),大致变化趋势为:埋线后8h开始升高,3d时达峰,后逐渐下降,至21d时降到埋线前水平,其间8h、3d、7d、14d组之间比较,差异不具显著性(P>0.05);(2)羊肠线、PGLA线组间同一时间点比较:羊肠线各时间点组MC脱颗粒率较PGLA线各时间点组低,但差异不具显著性(P>0.05)。4.SP阳性细胞表达:(1)各组大鼠“足三里”穴区局部内均可见不同程度的SP阳性细胞表达,阳性表达呈棕黄色或棕褐色。(2)各组SP阳性细胞表达结果:①与空白组比较,空刺组仅8h时间点组SP表达水平显著升高(P<0.001),空刺后3d、7d、14d、21d组差异不具显著性(P>0.05);羊肠线8h、3d、7d、14d组SP阳性细胞表达均有不同程度的升高(P<0.001,P<0.05),21d组差异不具显著性(P>0.05),大致变化趋势为:羊肠线埋入后8h开始逐渐升高,7d时达峰,后逐渐下降,至21d时降到埋线前水平,其间7d组SP阳性细胞表达较8h组增多(P<0.05);PGLA线3d、7d、14d组SP 阳性细胞表达均有不同程度的升高(P<0.001),8h、21d组差异不具显著性(P>0.05),大致变化趋势为:PGLA线埋入后3d开始升高,7d时达峰,后逐渐下降,至21d时降到埋线前水平,其间7d组SP 阳性细胞表达较3d组增多(P<0.05),14d组SP阳性细胞表达较7d组明显降低(P<0.01),21d组SP阳性细胞表达较14d组明显降低(P<0.05)。②羊肠线、PGLA线组间同一时间点SP P阳性细胞表达比较,差异不具显著性(P>0.05)。5.HA 阳性细胞表达:(1)各组大鼠“足三里”穴区局部内均可见不同程度的HA阳性细胞表达,阳性表达呈棕黄色或棕褐色。(2)各组HA阳性细胞表达结果:①与空白组比较,空刺后8h、3d时间点组HA表达水平显著升高(P<0.001,P<0.01),7d、14d、21d组比较差异不具显著性(P>0.05);羊肠线8h、3d、7d、14d组HA表达均有不同程度的升高(P<0.001,P<0.01,P<0.05),21d组差异不具显著性(P>0.05),大致变化趋势为:羊肠线埋入后8h开始逐渐升高,至第7d达峰,后逐渐下降,至21d时降到埋线前水平;PGLA线8h、3d、7d、14d、21d组HA表达水平均升高(P<0.001),大致变化趋势为:PGLA线埋入后8h开始升高,3d~7d达峰后开始下降,至21d时仍高于埋线前,其间3d组HA表达水平较8h组,14d组HA表达水平较7d组均升高(P<0.05)。②羊肠线、PGLA线组间同一时间点HA 阳性细胞表达比较:PGLA线3d组HA表达水平高于羊肠线3d组表达水平(P<0.05)。结论:1.羊肠线、PGLA线埋入大鼠“足三里”穴后,均能不同程度的引起穴区局部MC脱颗粒率、SP、HA表达发生动态变化。2.羊肠线、PGLA线埋入大鼠“足三里”穴后引起“足三里”穴区局部MC脱颗粒、SP、HA表达发生的动态变化之间有一定差异。3.埋植线体是引起“足三里”穴区上述组织细胞化学动态变化的主要因素,该动态变化可能是埋线后穴位局部时效性刺激效应的参与机制之一,且不同线体之间有一定差异。4.MC激活介导、SP、HA共同参与的穴区局部适度炎症动态变化可能是穴位埋线效应的源头启动环节之一。