【摘 要】
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目的:研究通过脂质体Oligofectamine将针对α珠蛋白肽链（以下简称α链）特异设计的siRNA（Short interference RNA）瞬时转染K562细胞后,观察K562细胞的α链mRNA的表达水平以及K562
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目的:研究通过脂质体Oligofectamine将针对α珠蛋白肽链（以下简称α链）特异设计的siRNA（Short interference RNA）瞬时转染K562细胞后,观察K562细胞的α链mRNA的表达水平以及K562细胞增殖能力在转染后24、48、72、96小时的变化,以探讨α链特异的siRNA对K562细胞α链mRNA表达及细胞增殖能力的影响。方法:将针对K562细胞的α链特异设计的、化学方法合成的siRNA以瞬时转染的方式通过脂质体Oligofectamine转染K562细胞,在转染后24、48、72、96小时等时点上,采用实时定量逆转录聚合酶链反应（Real-timequantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RQ-PCR）、CCK-8（Cell counting kit-8）等方法分别检测转染后K562细胞α链mRNA表达水平及细胞增殖能力的变化。结果:转染后48、72小时,实验组(60Pmol组)的α链mRNA表达水平较对照组均显著下调,其中转染后48h的α链的-△△Ct值为-2.6±0.8;转染后72h的α链的-△△Ct值为-1.9±0.6;两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。转染后48、72、96小时,实验组细胞增殖与对照组相比抑制明显,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,而转染后24、48、72、96小时,脂质体组细胞增殖与对照组相比抑制不明显,两组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）结论:通过脂质体Oligofectamine将α链特异的siRNA瞬时转染K562细胞后,可在转染后48、72小时等时点上有效下调α链mRNA的表达水平,并显著影响细胞的增殖。K562细胞α链mRNA的表达存在RNA干扰的调控机制,K562细胞α链mRNA的表达水平可被α链特异的siRNA有效降低,同时K562细胞的增殖能力与α链mRNA的表达水平有一定关系。
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