猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2,PCV2）感染可引起猪免疫抑制性疾病。血管内皮细胞（VEC）作为PCV2的靶细胞,在免疫应答及炎性调控中起着重要的作用。实验室前期研究显示,PCV2感染猪髋动脉内皮细胞（PIEC）诱导分泌的内皮源IL-8能够抑制单核源树突状细胞（MoDC）的功能与成熟。本研究利用Transwell建立的PIEC与MoDC共作用体系,通过基因芯片技术、Western Blot及激光共聚焦技术,从基因及蛋白水平分析PCV2诱导的内皮源IL-8抑制MoDC成熟的信号通路;利用分子探针标记技术完善PCV2诱导的内皮源IL-8对MoDC粘附功能的影响,为阐明PCV2致病机理提供实验依据。按培养方式不同分为诱导后共培养和诱导共培养。根据PIEC不同处理方式分为共培养对照组（PIEC-DC）、对照接毒共培养组（PCV2-PIEC-DC）、IL-8基因沉默共培养组(IL-8^low-PIEC-DC)、IL-8过表达共培养组(IL-8^hi-PIEC-DC)、IL-8抗体处理共培养组（Ab-PIEC-DC）。收集各组的MoDC。利用分子探针标记法,通过荧光显微镜观察计数,计算粘附率,分析不同处理组MoDC粘附功能变化。结果显示,两种培养方式中各组变化趋势基本相同。PIEC-DC组的粘附率显著高于PCV2-PIEC-DC组和IL-8^hi-PIEC-DC组,但显著低于IL-8^low-PIEC-DC组;Ab-PIEC-DC组的粘附率高于PIEC-DC组,提示在共培养方式中,PCV2诱导的内皮源IL-8抑制了MoDC的粘附功能。按诱导后共培养方法,利用Agilent基因芯片分析单独对照组（DC）、PIEC-DC组、PCV2-PIEC-DC组、IL-8^low-PIEC-DC组、IL-8^hi-PIEC-DC组中MoDC基因表达谱变化,筛选2倍以上差异基因。通过GO分析及Pathway分析,显示不同处理组MoDC差异基因主要涉及免疫反应、抗原递呈、炎性反应、血管形成及细胞粘附等功能,且差异基因主要富集于与MoDC成熟相关的NF-κB信号通路。利用Western Blot方法分析不同处理组MoDC中IKBα表达量变化;激光共聚焦观察不同处理组MoDC NF-κB p65入核情况。结果显示,NF-κB p65在两种方法中趋势一致,与DC组相比,PIEC-DC组中NF-κB p65表达量显著降低,IKBα表达量显著升高;与PIEC-DC组相比,PCV2-PIEC-DC组和IL-8^hi-PIEC-DC组中NF-κB p65表达量显著降低,IKBα表达量显著增高;与PIEC-DC组相比,IL-8^low-PIEC-DC组NF-κB p65表达量显著升高,IKBα表达量显著降低。以上表明PCV2感染上调的内皮源IL-8抑制了MoDC中NF-κB经典信号通路的激活及NF-κB p65的核转移。设立对照接毒共培养组（PCV2-PIEC-DC）、IL-8抗体处理接毒共培养组（PCV2-Ab-PIEC-DC）及其BAY 11-7082预处理组（PCV2-Ab-PIEC-BAY-DC）、IL-8过表达共培养组(IL-8^hi-PIEC-DC)、IL-8抗体处理过表达共培养组(IL-8^hi-Ab-PIEC-DC)及其BAY 11-7082预处理组(IL-8^hi-Ab-PIEC-BAY-DC)。通过实时定量RT-PCR方法检测不同组MoDC中与其成熟相关IL-12、GM-CSF表达量变化。结果显示,PCV2-Ab-PIEC-DC组、IL-8^hi-Ab-PIEC-DC组中IL-12、GM-CSF表达量显著高于PCV2-PIEC-DC组和IL-8^hi-PIEC-DC组;PCV2-Ab-PIEC-BAY-DC组及IL-8^hi-Ab-PIEC-BAY-DC组中IL-12、GM-CSF表达量明显低于PCV2-Ab-PIEC-DC组、IL-8^hi-Ab-PIEC-DC组,表明PCV2感染导致的内皮源IL-8上调进一步抑制MoDC中IL-12、GM-CSF的表达,而IL-12、GM-CSF的表达与NF-κB经典信号通路密切相关。总之,PCV2感染导致的内皮源IL-8通过抑制MoDC中IκBα的激活及降解与NF-κB p65激活,导致NF-κB p65核转移受阻;抑制MoDC相关细胞因子IL-12、GM-CSF的表达,从而抑制MoDC的成熟。