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西藏猫乳（?????????）为鼠李科植物西藏猫乳Rhamnella gilgitica Mansf.et Melch.的干燥心材,又名“松生等”、“森等”,是藏族习用药材,主要分布于西藏察隅、芒康,云南西北部和四川西南部。《晶珠本草》记载:“松生等味微苦,性凉、燥、湿,活血,干黄水,能治麻风”。现收载于《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药》（第一册）。现代研究表明,西藏猫乳抗类风湿性关节炎疗效显著,但其药效物质基础尚不明确,限制了该药材进一步临床开发研究。类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种常见的系统性自身免疫疾病,严重影响人民健康。藏医认为RA与机体关节腔中“黄水”积聚过甚有关,主要通过调节“黄水”使机体“三因”达到平衡来治疗RA。故本文以传统藏医药理论为指导,以活性为导向,探讨藏药藏药西藏猫乳抗炎活性,并对其活性部位进行抗RA的药效学评价及化学成分研究,预测其抗RA有效成分,进一步阐明西藏猫乳抗RA药效物质基础,为临床应用和制剂开发提供科学依据。目的1.探讨西藏猫乳的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水4个萃取部位抗炎活性。2.评价西藏猫乳乙酸乙酯部位对RA模型大鼠的药效作用。3.阐明西藏猫乳乙酸乙酯部位的化学成分组成。4.预测西藏猫乳抗RA的活性成分。方法1.采用MTT法和Griess法探讨西藏猫乳石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位对RAW264.7细胞的抗炎作用。2.采用牛II型胶原蛋白与完全弗氏佐剂建立胶原诱导性关节炎大鼠模型（Collagen-inducedarthritis,CIA）,以西藏猫乳乙酸乙酯提取物（9.71,19.43,38.85 mg/kg）灌胃干预23天,考察大鼠体重、足趾肿胀容积、关节炎指数、免疫器官指数、膝关节组织病理变化及血清细胞因子表达,评价西藏猫乳乙酸乙酯部位对CIA模型大鼠的药效作用。3.采用UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定西藏猫乳乙酸乙酯部位的化学成分,经UNIFY软件等方式进行数据处理,结合文献报道对质谱碎片信息进行推测,实现对西藏猫乳乙酸乙酯部位化学成分的快速鉴定。4.运用正相硅胶、Sephadex LH-20、RP-18、半制备型高效液相色谱等分离技术对西藏猫乳乙酸乙酯部位进行分离纯化,并结合核磁共振、质谱等波谱学方法对单体化合物进行结构鉴定。5.采用网络药理学技术,预测西藏猫乳抗RA的活性成分,分子功能,生物学过程及通路,构建“化学成分-靶点-通路”网络,并结合文献分析西藏猫乳抗RA的潜在活性成分及作用靶标。6.采用分子对接技术,预测网络中的9个关键活性成分与9个关键靶标蛋白的相互作用,并结合文献进一步分析验证。结果1.西藏猫乳各提取部位均具有抗炎活性,其中乙酸乙酯和石油醚部位抗炎活性较好,活性强弱顺序为石油醚部位≈乙酸乙酯部位＞正丁醇部位＞水部位。2.西藏猫乳乙酸乙酯提取物对CIA模型大鼠的体重有恢复作用;能降低大鼠关节炎指数,减轻足肿胀;降低CIA模型大鼠胸腺指数和脾脏指数;明显减轻炎性细胞浸润和滑膜细胞增生;抑制血清中IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α和INF-γ细胞因子表达,增加IL-4和IL-10的表达。3.利用UNIFY软件,结合一级质谱准分子离子、二级质谱碎片离子及化合物裂解规律,与文献进行比较,从西藏猫乳乙酸乙酯部位中共鉴定出37个化合物,包括黄酮类化合物26个,皂苷类化合物6个,酚酸类化合物3个及脂肪酸类化合物2个。4.从西藏猫乳乙酸乙酯部位中分离并鉴定了15个化合物,分别是:对羟基苯甲酸（1）,（-）-南烛木树脂酚（2）,丁香酸（3）,儿茶素（4）,（-）-表儿茶素（5）,tristin（6）,1,2-bis（4-hydroxyphenyl）ethane（7）,bis（2-ethylhexyl）phthalate（8）,柚皮素（9）,山柰酚（10）,鼠李柠檬素（11）,芹菜素（12）,（+）-丁香脂素（13）,表丁香脂素（14）,（+）-皮树脂醇（15）,化合物1~8,11~15为首次从该植物中分离得到。5.网络药理学结果发现西藏猫乳19种主要成分可能作用于AR、HSPHSP90AA1、IGF1R、MAPK8、EGFR、SRC、AKT1、PIK3R1、RELA等关键靶点,GO功能富集分析得到GO条目262个（P＜0.05）,KEGG通路富集筛选得到70条信号通路（P＜0.05）,涉及炎症、免疫、类风湿关节炎等相关信号调节通路。6.分子对接结果显示柚皮素、槲皮素、山柰酚、1,2-二（4-羟基苯基）乙烷、Tristin等化学成分与SRC、MTOR、IGF1R、EGFR、MAPK8靶点结合力最强。结论1.明确了藏药西藏猫乳抗炎活性部位及化学成分组成,初步阐明了西藏猫乳抗RA药效物质基础,为更有效地评价该药材质量及临床合理利用提供参考。2.揭示了藏药西藏猫乳抗RA可能与下调IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-17和上调IL-4、IL-10等炎症细胞因子有关。3.阐明了藏药西藏猫乳通过“多成分-多靶点-多途径”的协同作用发挥抗RA作用,可能与柚皮素、槲皮素、山柰酚、1,2-二（4-羟基苯基）乙烷、Tristin等活性成分有关,为临床研究提供科学参考。