黄瓜是我国重要的蔬菜作物,但其受根结线虫的危害严重。利用RNAi技术,通过转根结线虫mapk双链RNA表达载体沉默线虫的mapk基因,对根结线虫具有良好的防治效果,是防治根结线虫比较低毒、经济的方式。近年来,转基因作物的风险评价越来越受到重视。土壤微生物因数量多,对外界反应灵敏等优点成为转基因作物安全性的重要评价标准。为了评价该转基因黄瓜的安全性,明确转mapk双链RNA表达载体黄瓜植株对土壤微生物多样性的影响,分别采用16s rRNA、18s rRNA、16s rRNA和18s rRNA基因克隆文库方法对非转基因黄瓜和转基因黄瓜土壤细菌、真菌、古菌及线虫群落多样性进行分析。转基因黄瓜对细菌多样性影响分析结果表明,从门、纲分类水平以及多样性指数角度上分析,转基因黄瓜未对土壤细菌群落产生明显影响。研究了转基因黄瓜对土壤真菌多样性影响,发现转基因黄瓜土壤和非转基因黄瓜土壤的真菌类群均包括子囊菌亚门、子菌亚门真菌、壶菌门真菌、未定地位真菌和未分类真菌,子囊菌亚门真菌为优势菌群。非转基因黄瓜土壤真菌多样性高于转基因黄瓜土壤,但其优势真菌的比例明显低于转基因黄瓜土壤,而非转基因黄瓜土壤中比例较高的尖孢镰刀菌未在转基因黄瓜土壤中发现。这表明mapk双链RNA干扰表达载体的转基因黄瓜对土壤真菌具有一定的影响。对土壤中某些类群真菌具有一定的抑制作用。在对根际土壤古菌多样性影响的研究中表明,在门和属分类水平上,2种土壤中优势菌群和非优势菌群的种类一致。从多样性指数角度分析,两种土壤古菌群落的Shannon、Simpson和Chao值差异不大。总体来看,两种土壤古菌类群差异不显著,转基因黄瓜未对根际土壤古菌群落产生明显影响。非转基因黄瓜和转基因黄瓜采收期及其结果期对土壤线虫多样性进行了研究,结果发现,在属分类水平上,三种土壤中小杆亚纲属,头叶线虫属,拟丽突属和裸矛属比例较高,为优势菌群。从多样性指数角度分析,三种土壤线虫群落的Simpson和Chao值有一定的差异,而Shannon值相近。总体来说,转基因黄瓜对土壤线虫某些属多样性有一定的影响,其在不同文库中所占的比例有所变化,但转基因黄瓜对其影响是暂时性的,当转基因黄瓜采收后,线虫种属恢复至原有水平。图30幅,表9个,参考文献134篇。