【摘 要】
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目的建立小鼠放射性心脏损伤（Radiation-induced heart damage,RIHD）动物模型并对其进行黄芪甲苷（AstragalosideⅣ,AS-Ⅳ）药物干预,探讨AS-Ⅳ介导RIHD中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白-3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein-3,NLRP-3）炎症小体表达
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目的建立小鼠放射性心脏损伤（Radiation-induced heart damage,RIHD）动物模型并对其进行黄芪甲苷（AstragalosideⅣ,AS-Ⅳ）药物干预,探讨AS-Ⅳ介导RIHD中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白-3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein-3,NLRP-3）炎症小体表达的机理,明确AS-Ⅳ对小鼠RIHD的保护修复作用。方法将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组,每组10只:空白对照组、单纯照射组、黄芪甲苷低剂量组（AstragalosideⅣ-low,AS-Ⅳ-L）、黄芪甲苷高剂量组（AstragalosideⅣ-High,AS-Ⅳ-H）。其中空白对照组不照射,使用6MV-20Gy的射线剂量对其余三组小鼠的心脏组织进行单次照射。AS-Ⅳ-L、AS-Ⅳ-H组分别灌胃给予40mg/kg、80mg/kg AS-Ⅳ;其余组将等量生理盐水选择以灌胃的方式给予。每日1次,连续28天。建立小鼠RIHD实验药物模型,第28天摘取小鼠心脏组织进行检测。小鼠各组心脏的形态学变化的观察采用伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色法。酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测炎性浸润因子白介素-1β、18（Interleukin-1β、18,IL-1β、18）在各实验组中小鼠心脏组织损伤模型中的表达。蛋白印迹法（Western blotting,WB）、免疫组织化学法（Immunohistochemistry,IHC）检测NOD样受体蛋白3（NOD-Like receptor 3,NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（Cysteine aspartate specific protease-1,Caspase-1）在各组小鼠心脏组织中的表达。结果HE染色可见,空白对照组心肌细胞排列规则,血管结构完整清晰,内皮完整。单纯照射组血管内皮结构模糊,血管内皮不完整,内皮细胞明显缺失,周围少量心肌细胞溶解,心肌细胞出现不同程度的变形及断裂,病变程度严重。AS-Ⅳ-L组心肌细胞排列规则,血管内皮结构较模糊,局部区域血管内皮细胞减少,少量内皮细胞溶解,病变程度轻于单纯照射组。AS-Ⅳ-H组心肌细胞排列规则,血管内皮结构欠清晰,较空白对照组病变略严重,但轻于AS-Ⅳ-L组。与空白对照组比,单纯照射、AS-Ⅳ-L、AS-Ⅳ-H组中IL-18、IL-1β炎性浸润因子和NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白在辐照致使小鼠损伤的心脏组织中表达量明显增高（P＜0.05）。与单纯照射组比,AS-Ⅳ-L、AS-Ⅳ-H组中IL-18、IL-1β炎性浸润因子和NLRP3、ASC、Caspase-1在小鼠辐照损伤的心脏组织中的蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。与AS-Ⅳ-L组比,AS-Ⅳ-H组中炎性浸润因子IL-18、IL-1β和NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白在辐照损伤的小鼠心脏组织中的表达含量有所降低（P＜0.05）。结论AS-Ⅳ通过减轻IL-18、IL-1β炎症因子和NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白在小鼠心脏组织中的含量来介导NLRP-3炎症小体的表达,改善小鼠放射性心脏损伤。
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