论文部分内容阅读
表面增强激光解吸/电离—飞行时间—质谱(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS))技术是一种近年来新兴的蛋白质组学(proteomics)的研究手段,它将蛋白芯片和质谱技术结合为一体,具有自动快速、灵敏特异和高通量等特点,可以定量检测和比较蛋白质表达谱差异及研究蛋白质之间相互作用,是蛋白质组学研究领域的一个全新的平台。目前,SELDI-TOF-MS技术被广泛应用于肿瘤标志物的筛选和发病机制的研究中。食管鳞状上皮癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是我国特别是我省高发的恶性肿瘤之一。早期诊断、早期治疗是提高ESCC患者治疗效果的重要手段,而大多数的新发ESCC患者已是中、晚期,影响了ESCC治疗效果;另外,由于手术前对有无淋巴结转移(lymph node metastasis,LM)判断不准确,导致手术方式选择上存在一定的盲目性。本研究采用SELDI-TOF-MS技术,首先通过对ESCC患者组和正常对照组的血清蛋白指纹的对比,研究ESCC患者血清蛋白表达谱的改变;再进行有无LM的ESCC组内对比,寻找差异蛋白峰。为临床ESCC的早期诊断和手术前有无LM判断寻找一种简洁、准确、无创的新方法。目的:分析ESCC患者血清蛋白表达谱的改变;比较有无LM的ESCC患者血清蛋白指纹图谱,筛选与LM相关的蛋白峰。方法:术前收集64例ESCC患者和60例性别、年龄相匹配的健康成人血清,采用弱阳离子交换型(weak Cation Exchanger-2,WCX-2)蛋白芯片为检查介质,经SELDI-TOF-MS测定蛋白指纹图谱。行有癌和无癌的对照研究;ESCC患者组内分别按性别、年龄、肿瘤位置、肿瘤大小、浸润程度和有无LM分别进行对照,得到蛋白指纹图谱并用Biomarker Wizard软件分析比较。结果:(1)在质量/电荷(m/z)0—5000范围内,比较ESCC与健康成人血清检测出120个蛋白峰,其中31个差异蛋白峰有统计学意义(P<0.05);10个蛋白峰有显著差异(P<0.01)。(2)ESCC组内按浸润程度分组对比发现,T1与T3、T4比较有1个m/z是4174的差异蛋白峰(P<0.05)。(3)按有无LM分组,发现3个蛋白峰有统计学意义(P<0.05),m/z分别为3970、4174、和4277。其中m/z为4174蛋白峰是浸润组和LM组所共有的。(4)年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小分组未发现差异蛋白峰。结论:ESCC患者组和健康成人组比较,血清蛋白有显著有差异;ESCC浸润程度的不同和有无LM血清蛋白指纹存在一定差异,但远较ESCC与健康成人之间差异小;浸润程度严重和LM在血清蛋白指纹中存在着一定的共性。