目的:软骨肉瘤作为发病率排名第二的原发恶性骨肿瘤,它在成年男性中比较多见。到目前为止该肿瘤的诊断及治疗都依然是困扰着全世界研究人员和临床工作者的难题。放射疗法和化学治疗对大部分的软骨肉瘤都很难起到效果,外科手段仍是目前为止最有效的治疗方法。然而常常存在患者无法进行手术的情况,同时手术治疗也会造成残疾或肢体功能障碍,因此对于软骨肉瘤的发生发展,我们需要有更多的认识和了解。E-钙黏蛋白是跨膜糖蛋白钙黏蛋白中的一种。频繁出现在各种细胞的上皮间质转化过程中,E-钙黏蛋白转变为N-钙黏蛋白是这一过程的重要特征之一。双调蛋白是表皮生长因子家族成员之一,可以调节不同细胞的侵袭、迁移及增殖能力,在各种肿瘤的发生发展中也扮演着重要的角色。本研究探究双调蛋白对软骨肉瘤的影响及相关机制,也涉及探究软骨肉瘤细胞的上皮间质转化的过程,有助于人类加深对软骨肉瘤的认知,也对今后软骨肉瘤的诊断治疗的进步有着重要的意义。方法:将一定浓度的双调蛋白配入完全培养基中,并将软骨肉瘤细胞系SW1353与CAL-78放入该培养基中培养获取受到双调蛋白影响的软骨肉瘤细胞。通过转染双调蛋白的Si RNA获得内源性双调蛋白下调的细胞,同时使用MEK抑制剂U0126和PI3K抑制剂LY294002处理细胞后获得阻断了相关通路的软骨肉瘤细胞,并将这些细胞再次以双调蛋白处理后进行下一步试验。采取Transwell侵袭实验、CCK8实验、划痕实验、黏附实验分别测量各组细胞的侵袭、增殖、迁移、黏附能力。利用Real-Time PCR和Western Blot实验测得了实验过程中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、SLUG等相关因子的蛋白和基因水平的变化。结果:一、双调蛋白作用于软骨肉瘤细胞系SW1353及CAL-78后,两种细胞的侵袭力增强,且E-钙黏蛋白表达下降而N-钙黏蛋白、SLUG的表达上升,MEK/ERK和PI3K/AKT通路的相关蛋白磷酸化水平上升。二、转染双调蛋白Si RNA、MEK抑制剂U0126和PI3K抑制剂LY294002处理后的软骨肉瘤细胞再次予以双调蛋白处理后,以上表现则受到抑制。三、本实验还发现双调蛋白作用于软骨肉瘤细胞后,其迁移、增殖及黏附能力也有所增强,且Snail、Twist1等其他上皮间质转化过程中重要的调控因子的基因表达也有所上升。本研究所有试验重复三次,统计学检测p值均小于0.05,结果有显著性差异。结论:本研究表明,双调蛋白通过下调E-钙黏蛋白的表达来增强软骨肉瘤细胞侵袭。MEK/ERK和PI3K/AKT通路与上皮间质转化过程可能参与这一过程。同时,双调蛋白对软骨肉瘤细胞的增殖、迁移和黏附能力也有增强的作用。