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目的1.研究筛选并比较圣约翰草与逍遥丸对慢性应激加高脂饲料诱导的糖耐量异常大鼠模型糖脂代谢的影响：2.研究逍遥丸对慢性应激加高脂饲料诱导的糖耐量异常大鼠模型糖脂代谢的药效学作用,筛选最佳剂量；3.探讨逍遥丸对慢性应激加高脂饲料诱导的糖耐量异常大鼠模型糖脂调节作用的机制；4.研究2型糖尿病患者(T2DM)清晨唾液皮质醇水平与血糖水平的关系,探讨2型糖尿病患青HPA轴功能与糖脂代谢的关系。方法基础研究：1.采用纱布束缚、PVC束缚筒束缚、大鼠固定架制动和悬尾四种应激方式随机应激大鼠,同时以高脂饲料喂养大鼠,建立慢性应激加高脂饲料诱导的糖耐量异常大鼠模型。大鼠随机分为正常对照组(普通饲料),糖耐量异常模型组f蒸馏水2ml),糖耐量异常模型+盐酸氟西汀(10mg/kg)组,糖耐量异常模型+圣约翰草(300mg/kg)组,糖耐量异常模型+逍遥丸(4.0g/kg)组。每天给药1h后随机给予束缚制动应激。造模第一天起各组分别按上述剂量灌胃给药,同时每天记录大鼠摄食量,每周测定大鼠体重,给药3,5,7周后测定糖耐量,给药8周后断头处死大鼠。测定大鼠肝脏、肾脏、脾脏及肾上腺脏器指数,检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、血浆总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)及糖原含量：2.大鼠随机分为正常对照组(普通饲料),糖耐量异常模型组(蒸馏水2ml,糖耐量异常模型+盐酸氟西汀(10mg/kg)组,糖耐量异常模型+高剂量逍遥丸(4.0g/kg)组,糖耐量异常模型+中剂量逍遥丸(2.4g/kg)组,糖耐量异常模型+低剂量逍遥丸(0.8g/kg)组,采用高脂饲料喂养大鼠。每天给药1h后随机给予束缚制动应激,造模第一天起各组分别按上述剂量灌胃给药,同时每天记录大鼠摄食量,每周测定大鼠体重,给药1,3,5周后测定糖耐量,给药第6周断头处死大鼠。测定大鼠肝脏、肾脏、脾脏及肾上腺脏器指数,胰岛素(INS)、血浆总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、肝糖原含量;3.大鼠随机分为正常对照组(普通饲料),糖耐量异常模型组(蒸馏水2ml),糖耐量异常模型+盐酸氟西汀(10mg/kg)组,糖耐量异常模型+高剂量逍遥丸(0.8g/kg)组,糖耐量异常模型+中剂量逍遥丸(0.4g/kg)组,糖耐量异常模型+低剂量逍遥丸(0.2g/kg)组。其他处理同3：4.通过测定五种剂量逍遥丸给药后血浆促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量及海马糖皮质激素受体(GR)基因表达水平,探讨逍遥丸通过基因调控对HPA轴的调节作用。临床研究：收集筛选出符合要求的119例T2DM患者的基本资料,早晨6：30采集患者空腹静脉血样,测定血糖(FBG)、胰岛素(INS)、C-肽(C-P)、糖化血红蛋白(HbAlc)、血脂等指标,其中血脂包括：胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、载脂蛋白比值(apoAI/B)。收集患者早晨清醒0min及15min唾液,检测唾液皮质醇含量,计算差值。唾液皮质醇采用放射免疫试剂盒。结果进行Spearmen统计学分析,研究不同HbAlc水平患者清晨唾液皮质醇水平,探讨T2DM患者HPA轴功能与血糖、血脂之间的关系。结果基础研究：1.与糖耐量异常大鼠模型相比,逍遥丸对体重降低的改善优于阳性对照氟西汀组和圣约翰草组：给药3、5周后,逍遥丸对30min糖耐量异常分别改善12%,8%,改善程度优于圣约翰草组；氟西汀组对30min糖耐量异常未见明显改善；给药7周后,逍遥丸对糖耐量异常改善20%：圣约翰草组和氟西汀组也有改善作用；逍遥丸对脾脏萎缩有改善作用；对TG升高和HDL-C降低分别改善46%,19%,具显著性差异；氟西汀组对脾脏萎缩及肝脏萎缩：有改善作用,圣约翰草仅对肝脏萎缩有改善作用：2.与糖耐量异常大鼠模型相比,逍遥丸4.0g/kg、2.4g/kg、0.8g/kg三个剂量对30min糖耐量异常的改善效果与剂量呈负相关,其中逍遥丸0.8g/kg剂量对30min糖耐量异常改善效果最佳,具显著性差异(P＜0.05)；对摄食量、体重降低及肝脏、脾脏萎缩有明显改善：逍遥丸对血脂及INS异常的改善效果与剂量呈正相关,逍遥丸4.0g/kg剂量的改善效果最明显；3.与糖耐量异常大鼠模型相比,逍遥丸0.8g/kg、0.4g/kg、0.2g/kg三个剂量对30min糖耐量异常的改善效果无量效关系,其中逍遥丸0.8g/kg剂量对30min糖耐量异常改善明显,具显著性差异：对摄食量、体重降低及肝脏、脾脏萎缩、TG升高、INS降低均有改善作用,为二个剂量中效果最佳；这三个剂量逍遥丸对血脂及INS的改善未见明显量效关系；4.初步药效学试验结果表明,逍遥丸高(4.0g/kg)、中(2.4g/kg)、低剂量(0.8g/kg)三个剂量分别使GR mRNA表达升高了40%、30%、55%；同时,高剂量(4.0g/kg)使CRH降低16%,ACTH降低27%,CORT降低14%；中剂量(2.4g/kg)使CRH降低7%,ACTH降低20%,CORT未见明显改善；低剂量(0.8g/kg)使CRH降低2%,ACTH降低12%,CORT未见明显改善。药效学试验结果表明,逍遥丸高(0.8g/kg)、中(0.4g/kg)、低剂量(0.2g/kg)三个剂量分别使GR mRNA表达升高70%、55%、60%：同时,高剂量(0.8g/kg)使CRH降低6%,ACTH降低14%,CORT降低10%：中剂量(0.4g/kg)使CRH降低5%,ACTH降低7%.CORT降低10%；低剂量(0.2g/kg)使CRH降低4%,ACTH降低14%,CORT降低6%。临床研究：患者清晨唾液皮质醇水平与HbAlc水平呈正相关,具显著性差异(P＜0.01),血糖水平控制越好的患者,清晨唾液皮质醇水平升高越高,HPA轴负反馈回路敏感性越好：反之,长期的高血糖患者,清晨唾液皮质醇升高水平降低,HPA轴负反馈回路受损或消失,HPA轴敏感性与BMI、WRI呈负相关,与INS未见相关,HPA轴敏感性与脂代谢有相关性,但相关系数不高。结论1.中药逍遥丸对糖耐量异常模型大鼠的糖耐量异常有改善作用,其可通过降低TG含量、增加HDL-C含量、增加肝脏指数、增加肝糖原含量等途径改善糖耐量异常大鼠糖脂代谢水平：2.逍遥丸0.8g/kg剂量为改善糖耐量异常最佳剂量；3.逍遥丸对糖耐量异常模型大鼠长期应激时的GR mRNA表达有改善,对CRH含量的测定也表明逍遥丸通过改善GR mRNA的表达水平改善了GR的表达量,最终抑制了CRH的表达,改善HPA轴亢进,抑制HPA轴终产物CORT过度分泌,具有调节血糖的作用：4.T2DM患者其清晨唾液皮质醇水平与糖脂代谢具有一定的相关性。