【摘 要】
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第一部分 雌激素受体β亚型对人体乳腺癌细胞株生物学特性的影响目的:探讨雌激素受体β亚型(ERβ)对人乳腺癌细胞株生物学特性的影响及其作用机制.方法:通过基因稳定转染技术
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第一部分 雌激素受体β亚型对人体乳腺癌细胞株生物学特性的影响目的:探讨雌激素受体β亚型(ERβ)对人乳腺癌细胞株生物学特性的影响及其作用机制.方法:通过基因稳定转染技术,构建ERβ稳定表达的MDA-MB-435细胞株,运用MTT,流式细胞仪检测技术和Transwell等方法观察在不同雌激素浓度下,ERβ对该细胞株增殖,浸润和转移特性的影响;采用RT-PCR和/或western blot、明胶酶谱技术检测相关基因(cyclinA、cyclinE、cyclinD1、p21、MMPs、Ets-1、VEGF及b-FGF)表达水平的改变;并建立相应的人癌裸鼠原位移植瘤模型以验证体外实验的观察结果.结论:ERβ有促进乳腺癌细胞增殖,浸润和转移的作用,降低p21的表达,增加Ets-1和MMP-9的表达并增强MMP-9的活性可能是其潜在的作用机制之一.第二部分 自发性肺高转移人乳腺癌细胞系的建立目的:建立具有自发性肺高转移特性的人乳腺癌细胞素,为乳腺癌转移的相关研究提供一个良好的实验平台.方法:采用人乳腺癌细胞株MDA-MB-435构建裸鼠原位移植瘤模型,连续进行6轮肺转移筛选,取其肺转移灶建立具有自发性肺高转移特性的人乳腺癌细胞系(MDA-MB-435HM);并运用核型分析、MTT、流式细胞仪检测技术、Transwell、RT-PCR及基因芯片等方法比较该细胞系和源细胞的差异.结论:自发性肺高转移乳腺癌细胞系是研究乳腺癌转移机制的良好工具.
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