苜蓿根际芽孢杆菌的分离鉴定及特性分析

来源 :哈尔滨师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jq1983wyh
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芽孢杆菌(Bacillus spp.)具有营养要求简单,生长速度快,抗逆性强,代谢产物丰富等优点,使其在农业生产中被广泛的研究和应用。芽孢杆菌属于PGPR的一部分,既能防治植物病害,又能促进植物生长。苜蓿(Medicago sativa L.)是多年生豆科牧草,素以“牧草之王”著称。本研究以苜蓿根际芽孢杆菌为材料,对其防病和促生效果进行了初步评价,主要研究结果如下:1.芽孢杆菌的分离筛选及鉴定从盐碱土种植的苜蓿的根际土中共分离出138株芽孢杆菌,从中筛选出8株既有生防能力,又有促生潜能的菌株,根据形态学、生理生化及16S r DNA序列分析初步鉴定菌株CYY-1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilu s)、CYY-5为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、CYY-6为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、CYY-9蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、CYY-15为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)、CYY-20和CYY-25为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、CYY-42为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)。2.芽孢杆菌生防效果评价在平板对峙实验中,8株芽孢杆菌均能拮抗2种及以上供试植物病原真菌,其中CYY-6、CYY-20、CYY-25和CYY-42对尖孢镰刀菌有抑制效果,同时,这4株菌株的发酵液均能使尖孢镰刀菌菌丝及孢子生长异常,在盆栽实验中,4株菌株对由尖孢镰刀菌引起的苜蓿根腐病均有防治效果,其相对防效均达到53.96%以上。3.分离菌株促生效果评价在盐碱条件下,通过比较苜蓿株高、根长、地上部分干鲜重和根干鲜重6项指标,发现所有8株芽孢杆菌菌株均能不同程度的促进苜蓿生长。相比于对照(CK),菌株CYY-9、CYY-25、CYY-5、CYY-20和CYY-1促生效果显著(P<0.05),尤其是用菌株CYY-9处理后,6项指标较CK分别增加了27.99%、46.10%、51.15%、75.51%、62.50%、95.58%。而菌株CYY42、CYY-6和CYY-15能够显著促进植株地上部分生长,对植株根部促生不显著(P<0.05)。4.芽孢杆菌生物学特性分析分离出的8株芽孢杆菌均能不同程度的产HCN和羧甲基纤维素酶、合成嗜铁素和IAA、溶解无机磷,并具有ACC脱氨酶活性。所有分离菌株中产HCN能力最强的是CYY-1、CYY-6和CYY-20,产纤维素酶能力最强的菌株是CYY-25,其酶活力为0.364 IU/m L。8株菌株中产嗜铁素能力最强的是CYY-9,嗜铁素的相对含量为0.813。8株芽孢杆菌均随着L-Trp浓度增加,IAA合成量显著增加(P<0.05)。在L-Trp浓度为0时,菌株CYY-1、CYY-15和CYY-20能合成少量IAA,其他菌株的IAA合成量几乎为0。在L-Trp浓度为200和500μg/m L时,菌株CYY-9的IAA合成能力最强,合成量分别为6.76和14.46μg/m L·OD600。8株芽孢杆菌中溶磷能力最强的为CYY-9,溶磷量为470μg/m L。此外,供试菌株中CYY-1、CYY-5、CYY-9、CYY-20和CYY-25的ACC脱氨酶活性较高。
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