【摘 要】
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目的探讨不同浓度的雄激素对骨骼肌卫星细胞中结蛋白基因及结蛋白表达的影响。方法采用酶消化法原代培养骨骼肌卫星细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长,通过desmin及α-actin
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目的探讨不同浓度的雄激素对骨骼肌卫星细胞中结蛋白基因及结蛋白表达的影响。方法采用酶消化法原代培养骨骼肌卫星细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长,通过desmin及α-actin免疫荧光法对培养的骨骼肌细胞进行鉴定。选用原代培养3~4天的骨骼肌细胞,随机分成0组(空白对照组)、1组(0.01×10-3ng/ul雄激素组)、2组(0.04×10-3ng/ul雄激素组)、3组(0.16×10-3ng/ul雄激素组)、4组(0.64×10-3ng/ul雄激素组)、5组(1×10-3ng/ul雄激素组)。培养终止后,在倒置相差显微镜下观察骨骼肌细胞形态的变化。应用半定量PCR及Western blotting测定骨骼肌卫星细胞中结蛋白基因及结蛋白含量的表达。结果肛提肌卫星细胞呈圆形,少部分细胞不规则,形态学上与成纤维细胞相似。各组细胞结蛋白mRNA/GAPDHmRNA值:0组:1.093+0.003;1组:1.470+0.003;2组:1.691+0.004;3组:2.216+0.005;4组:2.731+0.003;5组:3.205+0.004。各组细胞结蛋白/GAPDH表达的值:0组:1.125+0.007;1组:1.374+0.005;2组:1.395+0.004;3组:1.446+0.005;4组:1.685+0.006;5组:1.835+0.006。在女性正常生理范围内,随雄激素浓度的增加,结蛋白基因表达增强,结蛋白表达增多。结论雄激素能促进结蛋白基因及结蛋白的表达,且随雄激素浓度的增加,其促进作用越强。
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