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目的 探讨神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植修复周围神经缺损的可行性，为建立促进周围神经再生新方法提供实验依据。 方法 ①建立NSCs体外培养模型：分别取胚胎（E12）和新生（出生1d）SD大鼠的大脑皮层分离培养，通过形态学观察和Nestin免疫细胞化学鉴定，以及BrdU（5-溴脱氧尿核苷）法检测细胞增殖能力，并对其分化后的细胞检测成熟神经细胞标志抗原MAP2和GFAP。②建立雪旺细胞（Schwann cells，SCs）体外培养模型：分别取新生和成年SD大鼠的坐骨神经，用混合酶消化法、差速贴壁法和低浓度胰酶快速消化法进行培养和纯化，通过形态学观察和S100免疫细胞化学鉴定，并行MTT法检测细胞增殖能力。③研究NSCs与几丁质膜、明胶海绵的生物相容性：从胚胎鼠大脑皮层获得的NSCs与几丁质膜、明胶海绵在有血清和无血清的不同条件下联合培养，观察NSCs生长情况及形态变化，并对其进行免疫细胞化学染色。④NSCs移植修复周围神经缺损：45只SD大鼠，将其坐骨神经切除后造成12mm神经缺损模型，用几丁质膜和明胶海绵桥接，随机分成3组，每组15只。在几丁质膜管中分别植入：A：胚胎鼠BrdU—NSCs；B：新生鼠BrdU—SCs；C：生理盐水，为空白对照组。术后4w、8w、12w，各组分别通过大体观察、神经电生理、组织学检查再生神经组织，并对NSCs、SCs移植后的存活情况进行检测。 结果 ①胚胎和新生大鼠NSCs培养、分化特点：取自胚胎和新生大鼠大脑皮层的细胞均呈现NSCs克隆球形态，表达NSCs特异性标志蛋白Nestin，并具有自我更新及体外扩增传代能力，可以诱导分化为神经元和神经胶质细胞，但两组细胞的Nestin及BrdU阳性率均有显著性差异（P＜0.05）。②新生和成年大鼠SCs培养、纯化特点：新生和成年大鼠SCs生长状态良好，均呈S100免疫细胞化学反应阳性，纯度均达95％以上，由生长曲线显示新生鼠SCs生长更快，第2代SCs倍增时间：新生鼠3d、成年鼠4d。③NSCs与几丁质膜、明胶海绵的生物相容性：NSCs接种至几丁质膜和明胶海绵后，在NSCs选择培养基中NSCs球往往粘附在几丁质膜上，仍能保持球形生长的特性，呈Nestin免疫细胞化学反应阳性；在NSCs分化培养