【摘 要】
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目的:探讨血管束植入联合同种异体骨髓基质干细胞移植治疗兔股骨头坏死骨缺损模型的可行性,探索治疗股骨头坏死的一种新方法,为进一步的临床应用奠定实验基础。方法:1同种异
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目的:探讨血管束植入联合同种异体骨髓基质干细胞移植治疗兔股骨头坏死骨缺损模型的可行性,探索治疗股骨头坏死的一种新方法,为进一步的临床应用奠定实验基础。方法:1同种异体骨髓基质干细胞移植前准备:穿刺兔双侧髂后上棘,抽取3ml骨髓,种植于细胞培养板内,加入条件培养液(15%胎牛血清、100u/ml青霉素钠、100u/ml链霉素、10mmol/Lβ甘油磷酸钠,10-8mmol/L地塞米松,50mg/L维生素C )5ml,细胞培养箱中培养。5天后首次换液,以后每3天换液一次。第三代细胞行低温冻存,7天后复苏,继续培养,传到第五代细胞时,向每个培养瓶中加入BrdU 100μl, BrdU的终浓度为2ug/ml。长满瓶底后消化、离心、制悬,复合细胞于胶原蛋白海绵上,每块海绵含20万个细胞,在细胞培养箱中孵育5小时备用。将第五代的骨髓基质干细胞做钙化结节检测及BMP免疫组化检测。骨髓基质干细胞与胶原蛋白海绵复合5小时后用甲醛固定,脱水、包埋、切片,行HE染色。2实验动物的处理:36只新西兰大耳白兔随机分成A、B、C3组,A组12只为单纯造模组,B组12只为同种异体骨髓基质干细胞移植组,C组12只为同种异体骨髓基质干细胞移植联合血管束植入组。所有动物的双侧股骨头均参加实验。取仰卧位,髋关节前侧切口,液氮冷冻股骨头3分钟,复温后从股骨颈前内侧向股骨头内钻孔
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