纳米磁流体介导的pEGFP-AFP-hTNFα对裸鼠体内肝癌细胞杀伤作用的实验研究

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目的:在前期试验证实纳米磁流体作为基因载体具有较高的转染效率的基础上,研究纳米磁流体介导的pEGFP-AFP-hTNFα对人肝癌细胞系裸鼠BALB/c皮下移植瘤模型的抑瘤作用。方法:建立人原发性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分成空白对照组、纯纳米磁流体组、纯pEGFP-AFP-hTNFα组、纳米磁流体pEGFP-AFP-hTNFα组4组。于瘤体内分别直接注射质粒pEGFP-AFP-hTNFα、纳米磁流体pEGFP-AFP-hTNFα,纯纳米磁流体,观察不同时段皮下肿瘤的生长情况并做病理学检查,免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD),原位末端标记(TUNEL)法检测细胞原位凋亡。同时,定量检测肿瘤裸鼠治疗前后的AFP值,并电镜下观察肿瘤细胞超微结构的变化,以及用RT-PCR检测肿瘤鼠心,肺,肾的人肿瘤坏死因子表达情况。结果:裸鼠皮下成瘤率100%;纳米磁流体pEGFP-AFP-hTNFα组的肿瘤体积31.28±13.82 mm~3、血清AFP含量36.26±5.46 u/l、肿瘤MVD 4.34±0.98均明显低于对照组肿瘤体积96.85±16.22血清AFP含量145.64±5.43肿瘤MVD 10.60±0.69(P<0.05),而细胞凋亡指数8.35±0.24,明显高于对照组5.15±0.47(P<0.05),可见较多的凋亡细胞。RT-PCR示肿瘤鼠心、肺,肾未见hTNFα表达,而肿瘤细胞则出现hTNFα的表达。结论:纳米磁流体作为基因载体,具有较高的转染效率,因而纳米磁流体pEGFP-AFP-hTNFα可显著抑制肿瘤的生长。由于具有磁性,若在外加定位磁场的情况下,还可进行靶向给药。
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